硫酸盐还原菌的测定+MPN法.docVIP

ICS 71．040．40 G 76 a雪 中华人民共和国国家标准 GB／T 14643．5—2009 代替GB／T 14643．5—1993 工业循环冷却水中菌藻的测定方法 第5部分：硫酸盐还原菌的测定 MPN法 Examination of bacteria and algae in industrial circulating cooling water—— Part 5：Examination of sulfate-reducing bacteria--MPN test 2009-05-18发布 2010—02—01实施 中华人民共j}Ⅱ国国家质量监督检验检疫总局省寿 中国国家标准化管理委员会厘111  GB／T 14643．5—2009 刖 置 GB／T 14643((工业循环冷却水中菌藻的测定方法》分为以下几个部分： ——第1部分：黏液形成菌的测定平皿计数法 ——第2部分：土壤菌群的测定平皿计数法 ——第3部分：黏泥真菌的测定平皿计数法 ——第4部分：土壤真菌的测定平皿计数法 ——第5部分：硫酸盐还原菌的测定MPN法 ——第6部分：铁细菌的测定MPN法 本部分为GB／T 14643的第5部分。 本部分代替GB／T 14643．5 1993《工业循环冷却水中硫酸盐还原菌的测定MPN法》。 本部分与GB／T 14643．5—1993相比，在技术内容上并无变化，只是对文本结构和文字进行了 修改。 本部分的附录A、附录B、附录C为规范性附录。 本部分由中国石油和化学工业协会提出。 本部分由全国化学标准化技术委员会水处理剂分会(sAC／TC 63／SC 5)归口。 本部分负责起草单位：中海油天津化工研究设计院、天津正达科技有限责任公司。 本部分主要起草人：朱传俊、张全、邵宏谦、李琳、白莹。 本部分于1993年首次发布。  GB／T 14643．5—2009 工业循环冷却水中菌藻的测定方法 第5部分：硫酸盐还原菌的测定 MPN法 1范围 GB／T 14643的本部分规定了工业循环冷却水中硫酸盐还原菌的测定方法。 本部分适用于工业循环冷却水中硫酸盐还原菌的测定，也适用于原水、生活用水及粘泥中硫酸盐还 原菌的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB／T 14643的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB／T 603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备(GB／T 603 2002，ISO 6353—1：1 982， NEQ) GB／T 6682分析实验室用水规格和试验方法(GB／T 6682--2008，ISO 3696：1987，MOD) 3方法提要 本法采用多试管发酵技术，在(29±1)℃培养21 d，如果试管内产生黑色沉淀并伴有硫化氢臭味的 表明阳性反应，采用MPN技术对被测试样中的硫酸盐还原菌进行计数。 4试剂和材料 本部分所用试剂，除非另有规定，应使用分析纯试剂和符合GB／T 6682中三级水的规定。 试验中所需制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB／T 603之规定制备。 4．1磷酸氢二钾。 4．2氯化铵。 4．3硫酸钠。 4．4氯化钙。 4．5硫酸镁。 4．6乳酸钠。 4．7酵母汁：生化试剂。 4．8硫酸亚铁铵。 4．9维生素C。 4．10氯化钠。 4．11氢氧化钠溶液：40 g／L。 4．12盐酸溶液：1+11。 4．13硫代硫酸钠。 4．14乙醇溶液：75％(体积分数)。 1  GB／T 14643．5—2009 4．15牛皮纸。 4．16医用脱脂棉。 5仪器、设备 5．1无菌箱(室)或超净工作台。 5．2蒸汽压力灭菌器。 5．3生化培养箱。 5．4电热干燥箱：温度可控制在60℃～280℃。 5．5电热恒温水浴锅：恒温范围37℃～100℃。 5．6刻度吸管：l mL。 5．7刻度吸管：5 mL。 5．8试管：150 mm×15 mm并配上密封的塞子。 5．9试管架。 5．10刻度三角瓶：500 mL。 5．11磨口三角瓶：100 mL。 5．12磨口试剂瓶：1 000 mL。 5．13容量瓶：l ODDmL。 6试验前准备 6．1无菌水的制备 将水分装在100 mL磨口三角瓶中，每瓶40 mL，每个三角瓶塞子和瓶口间插人一小纸片来防止粘 连，每个瓶子的瓶日均用牛皮纸包扎，以防污染，用蒸汽压力灭菌器于(121±1)℃灭菌15 rain。 6．2培养基的制备 6．2．1称取下列试剂： 磷酸氢二钾0．5 g； 氯化铵 1．0 g； 硫酸钠0，5 g； 氯化钙0．1 g； 硫酸