气相色谱质谱联用法测定蜂蜜中丙三醇的三甲基硅烷化衍生物.docx

Vol . 20 No . 2J OU RNAL O F ANAL YT ICAL SCI ENCEAp r .2004文章编号 :100626144 (2004) 0220154203气相色谱2质谱联用法测定蜂蜜中丙三醇的三甲基硅烷化衍生物胡小钟 , 余建新 , 林雁飞 , 吴涛 , 童维平(湖北出入境检验检疫局技术中心 ,武汉 430022)摘要 :蜂蜜样品用二甲基甲酰胺溶液解后 ,直接用 N ,O2双 ( 三甲基硅烷基) 三氟乙酰胺衍生 ,所生成的三甲基硅烷衍生物用色谱2质谱法测定 。本法与酶分析法进行了比 较 ,两者之间无显著性差异 。方法的线性范围为 20～2000 mg/ kg ,检出限为10 mg/ kg ,相对标准偏差为 0 . 4 %～1 . 4 % ,标准加入回收率为 98 . 8 %～102 . 4 % 。采用本方法检 测了 316 份蜂密的丙三醇含量 ,方法具有快速 、准确的特点 。关键词 :丙三醇 ;蜂蜜 ;三甲基硅烷衍生物 ;气相色谱2质谱法中图分类号 :O657 . 63 ; O623 . 413 ; S896 . 1文献标识码 :A蜂蜜是一种高度复杂的糖类饱和溶液 ,其中约 75 %是糖分 ,约 24 %是水分 。文献1 ,2 报道蜂蜜中某些适高渗压的酵母菌可将葡萄糖转化成多羟基化合物 ,如丙三醇 、D2阿糖醇和赤藓醇等 。L aub3 报道蜂 蜜中丙三醇的含量与蜂蜜中存在的微生物数量之间有一定的关系 。食品中丙三醇的分析方法有容量法 、比色法 、荧光光谱法 、液相色谱法 、气相色谱法4 和酶分析法5 ,6 ,上述方法中 ,适用于蜂蜜样品的有液相色谱法和酶分析法 ,尚未见气相色谱2质谱联用法检测蜂蜜中丙三醇含量的报道 。 本文建立了蜂蜜样品中丙三醇含量的色质联用检测方法 ,可检测含量低至 10 mg/ kg 的丙三醇三甲基硅烷衍生物 。样品无需复杂的净化 、分离过程 ,用溶剂溶解后 ,直接进行硅烷化衍生后测定 ,样品中其它 组分对丙三醇无干扰 。所建立的方法具有快速 、准确的特点 。1 实验部分1 . 1仪器和试剂Finnigan MA T GCQ 色质联用仪 ,色谱柱为 DB25 M S ,25 m ×0 . 25 mm ×0 . 25μm ; M T251 型液体混匀 器 , Yamato 公司 ;2 mL 玻璃小瓶 , HP 公司 。N ,N′2二甲基甲酰胺 ( DM F) : 分析纯 ; 丙三醇 : 色谱纯 ,将丙三醇溶于 DM F 中 ,配成 1 g/ mL 的储备液 ,使用时用 DM F 稀释至适当浓度 ; N ,O2双 (三甲基硅烷基) 三氟乙酰胺 (B S TFA) :美国 Supelco 公司 ,购 自武汉启威公司 ;丙三醇分析试剂盒 :德国 R2Biop har m 公司 ,购自北京赛恩思公司 。1 . 2色质联用仪条件载气 :氦气 ,恒定线速度 40 cm/ s ;进样口温度 :250 ℃,无分流进样 1 μL ;柱温程序 ; 初始温度 60 ℃,保 持 1 min ,以 10 ℃/ min 的 速 度 , 升 温 至 250 ℃, 保 持 12 min ; 色 谱2质 谱 接 口 温 度 : 250 ℃; 离 子 源 温 度 :200 ℃;离子化方式 : E I ;电子能量 :70 eV ;质量扫描范围 :50～350 m / z 。1 . 3实验方法称取 1 . 00 g 蜂蜜样品于 50 mL 小烧杯中 ,准确加入 25 mL DM F ,用玻棒轻轻搅拌使其充分溶解 。取 样品溶液 0 . 2 mL 于玻璃小瓶中 ,加入 0 . 2 mL B S TFA ,封口后在液体混匀器上快速混匀 1 min ,室温下静置 10 min 后 ,用微弱氮气流吹至近干 ,用正已烷定容至 0 . 4 mL ,供色质联用仪测定 。以保留时间和质谱收稿日期 : 2003209202通讯联系人 : 余建新154第 2 期分 析 科 学 学 报第 20 卷信息定性 ,外标法定量 。蜂蜜样品总离子流色谱图见图 1 ,丙三醇三甲基硅烷衍生物质谱图见图 2 。Fig. 1 Total ion current chromatogra m of TMSderivatives of glycerol in honeyFig. 2 Mass spectrogra m of TMS derivativesof glycerol in honey2 结果与讨论2 . 1 样品前处理方法适于进行硅烷化衍生的极性溶剂有吡啶 、DM F 、二甲基亚砜 、四氢呋喃等7 。本文采用 DM F 作溶剂 ,将蜂蜜样品搅拌溶解后 ,取一定体积进行衍生 ,在本文所采用的色谱条件下 ,蜂蜜样品中的其它