(五)肠道杆菌其他细菌.ppt

血清学鉴定 玻片凝集反应 ：鉴定痢疾杆菌 试管凝集反应 ：辅助诊断伤寒和副伤寒 （肥达反应） 待检菌 + 抗痢疾血清 + – 白喉棒状杆菌Corynebacterium diphtheriae 形态结构： G+； 细长而略弯曲，菌体一端或两端膨大呈棒状； 排列不规则，常呈V、L等字形； 无芽胞、鞭毛、荚膜。 Albert染色 Albert染色：菌体呈绿色，内有着色较深的蓝褐色的异染颗粒（储存高能磷酸盐的营养物质）。 白喉棒状杆菌 白喉棒状杆菌 培养特性： 在亚碲酸钾血琼脂平板（鉴别选择培养基） 上生长，能吸收碲盐还 原为元素碲，使菌落呈 黑色。 亚碲酸钾血琼脂平板 微生物学与免疫学实验（五） 肠道杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌 实验内容 肠道杆菌： 操作：肥达反应 示教：形态、鉴定、生化反应 白喉杆菌、炭疽杆菌： 示教：形态、生长现象 肥达反应 Widal Reaction —辅助诊断肠热症（伤寒和副伤寒） 原理: 用已知伤寒沙门菌O抗原、伤寒沙门菌H抗原，甲型副伤寒沙门菌H抗原以及乙型副伤寒沙门菌H抗原，分别与待检血清做试管凝集反应，测定待检血清中有无相应抗体及其效价。 操作：肥达反应 实验材料： 生理盐水NS 待检病人血清 (1:10稀释) 伤寒杆菌O抗原 伤寒杆菌H抗原 甲型副伤寒杆菌H抗原 乙型副伤寒杆菌H抗原 吸管1支/人 乳胶头1个/人 试管6支/人 试管架1个/2人 标签1个/人 *4人一组，每人做一种抗原 实验方法： 1.取6支试管横向排列于试管架上； 2.按倍比稀释法，依次加入： 单位（ml） 操作：肥达反应 1 2 3 4 5 6 生理盐水 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 待检血清 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 / 吹打3次 弃去0.5 菌液 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 从最后一管向前加，由低浓度到高浓度 血清稀释度 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 对照 3. 在第一管贴上标签，摇匀，41℃水浴2h，观察结果。 *吸管：拔掉乳胶头置于桶内 乳胶头：置于小篓 试管：置于锅内 操作：肥达反应 注意事项： 1.加液顺序：生理盐水、血清、菌液，每人取吸管一支，先吸生理盐水再吸血清，吸过血清的吸管不可再吸生理盐水；血清只取1次，0.5ml加至第一管； 2.菌液从最后一管开始由后向前加，尽量不要接触到血清； 3.标签贴在第1根试管上，写姓名和抗原，不要贴到试管架上； 4.弃试管和吸管时动作要轻，以免破碎，红色乳胶头中不要与黄色橡皮管分离。 操作：肥达反应 结果： 分析： 根据血清中抗体效价做出诊断？ 菌液 血清稀释度 效价 1：40 1：80 1：160 1：320 1：640 对照 伤寒H 伤寒O 甲副H 乙副H 操作：肥达反应 效价判定：以出现 ++ 凝集的血清最高稀释倍数为该血清抗体的效价。 血清稀释度 效价 1：40 1：80 1：160 1：320 1：640 对照 1：160 1：320 1：80 — ++++ +++ ++ + - - ++++ +++ ++ ++ - - ++++ +++ +