2017蛋白质工程的崛起.pptxVIP

回顾：基因工程的实质：基因 将一种生物的? ? 转移到另一种生物体内，后者产生它本不能产的? ，进而表现出? ? 。蛋白质新的性状基因工程的局限性： 基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。 这些蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 1.4蛋白质工程的崛起一、蛋白质工程崛起的缘由阅读P26第二自然段思考： 科学家在干扰素的保存和玉米的赖氨酸的产量上面临什么样的问题？如何解决这些问题？干扰素（丝氨酸）干扰素（半胱氨酸）体外可以保存半年体外很难保存改造玉米中赖氨酸含量比较低玉米中赖氨酸含量可提高数倍改造天冬氨酸激酶（异亮氨酸）天冬氨酸激酶（352位的苏氨酸）改造二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺）蛋白质功能不能满足需求改变蛋白质的结构问题1：解决：例如：思考与讨论？如何改造-----半胱氨酸-----------丝氨酸-------干扰素干扰素（改）体外很难保存体外可以保存半年问题2：如何对天然蛋白质的结构进行改造？(你认为直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？能否说出你的理由？)思考与讨论？如何改造-----半胱氨酸-----------丝氨酸-------干扰素干扰素（改）体外很难保存体外可以保存半年问题3、你能推测出干扰素基因改造前和改造后的该部分序列吗？ （半胱氨酸：UGU；丝氨酸：UCU）思考与讨论某多肽链的一段氨基酸序列是：……-丙氨酸-色氨酸-赖氨酸-甲硫氨酸-苯丙氨酸-……丙氨酸：GCU、GCC、GCA、GCG色氨酸：UGG 赖氨酸：AAA、AAG 甲硫氨酸：AUG苯丙氨酸：UUU、UUC 讨论：1、请写出决定这一段肽链的mRNA片段和基因片段的核苷酸序列。2、确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改 造目的基因（DNA）？（1）mRNA序列为： GCU（或C或A或G）UGGAAA（或G）AUGUUU（或C） 脱氧核苷酸序列： CGA（或G或T或C）ACCTTT（或C）TACAAA（或G）（2）确定目的基因的碱基序列后，就可以根据人类的需要改造它，通过人工合成的方法或从基因库中获取。DNA合成分子设计预期功能基因DNA氨基酸序列多肽链蛋白质三维结构生物功能mRNA折叠转录翻译二、蛋白质工程的基本原理(P27)1、蛋白质工程的途径-----中心法则的逆推预期蛋白质功能设计预期的蛋白质结构找到相应的脱氧核苷酸序列(合成基因)推测应有的氨基酸序列2、目标（P26）：蛋白质功能根据人们对 的特定需求，对蛋白质的 进行分子设计。结构3、实质：基因改造4、蛋白质工程的概念 P27前提：途径：目的： 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类对生产和生活的需求。了解蛋白质的结构和功能改造基因（基因修饰或基因合成）定向改造或制造蛋白质5、基因工程与蛋白质工程的区别蛋白质工程基因工程通过改造基因，以定向改造天然蛋白质，甚至创造自然界不存在的蛋白质将目的基因从供体转移到受体细胞，并在受体细胞中表达实质重组创新能生产自然界不存在的蛋白质只能生产自然界已存在的蛋白质结果蛋白质工程是在基因工程基础上，延伸出的第二代基因工程联系异想天开 能不能根据人类需要的蛋白质的结构，设计相应的基因，导入合适的细菌中，让细菌生产人类所需要的蛋白质食品呢？ 理论上讲可以，但目前还没有真正成功的例子。一些报道利用细菌生产人类需要的蛋白质往往都是自然界已经存在的蛋白质，并非完全是人工设计出来而自然不存在的蛋白质。主要原因是蛋白质的高级结构非常复杂，人类对蛋白质的高级结构和在生物体内如何行使功能知之甚少，很难设计出一个崭新而又具有生命功能作用的蛋白质，而且一个崭新的蛋白质会带来什么危害也是人们所担心的。 三、蛋白质工程的进展和前景1、进展P28： （1）对胰岛素的改造，使其成为速效型药品。 天然胰岛素制剂在储存中易形成二聚体和六聚体，延缓胰岛素从注射部位进入血液，从而延缓了其降血糖作用，也增加了抗原性，这是胰岛素B23-B28氨基酸残基结构所致。利用蛋白质工程技术改变这些残基，则可降低其聚合作用，使胰岛素快速起作用。该速效胰岛素已通过临床实验。 （2）水蛭素改造 水蛭素是水蛭唾液腺分泌的凝血酶特异抑制剂，它有多种变异体，由65或66个氨基酸残基组成。水蛭素在临床上可作为抗栓药物用于治疗血栓疾病。为提高水蛭素活性，在综合各变异体结构特点的基础上提出改造水蛭素主要变异体HV2的设计方案，将47位的Asn（天冬酰胺）变成Lys（赖氨酸），使其与分子内第4或第5位Thr（苏氨酸）间形成氢键来帮助水蛭素N端肽段的正确取向，从而提高凝血效率，试管试验活性提高4倍，在动