探讨高压氧对脑红蛋白表达的影响及其意义.docVIP

精品论文 参考文献 探讨高压氧对脑红蛋白表达的影响及其意义 李丽 （黑龙江鹤岗市人民医院 154100） 　　【摘要】目的:以大鼠为例来进行运动疲劳后脑缺氧在关注和高压氧治疗后脑红蛋白表达情况，对临床治疗提供参考。 方法：选取24只雄性大鼠来进行研究，其均为运动后脑缺氧症状，分组为对照组、运动疲劳组、高压氧治疗组。对其神经元以及影像学进行研究分析。结果:高压氧治疗组的大鼠其脑红蛋白表达比对照组要高，存在显著统计学差异。结论：运动疲劳后脑缺氧损伤经过高压氧治疗，其脑血红蛋白水平表达可以作为临床治疗的一个依据。 　　【关键词】 高压氧 脑红蛋白 运动性疲劳 免疫组织化学 小鼠 　　【中图分类号】R459.6 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）09-0146-02 　　脑红蛋白是在2000年的时候，一个德国的科学家发现的能够携带氧的球蛋白，脑红蛋白简称NGB，可以促进氧气在线粒体的释放。临床中对于运动性疲劳的研究一直都是比较多的，对于氧供给和氧流失之间的失衡关系是导致运动疲劳的主要因素和特征这样的结论还是比较统一的，脑缺血缺氧再灌注能够提升脑红蛋白，这样就能够让因为氧气供给不足而产生的脑神经损伤程度得到缓解，减少受损。所以，脑红蛋白是可以让缺氧性脑卒中患者得到保护的方式，临床中治疗效果比较好。高压氧对于人体利用和摄取氧具有很大的促进作用改善氧气自身体的运行情况，所以高压氧也是目前医学界认为能够对运动性疲劳起到良好改善的方法，其应用前景非常好，但是因为对运动性疲劳缺氧的机制研究还不够清楚，所以还需要更多的研究来支持。此次根据高压氧治疗后脑红蛋白指标来进行了研究分析，现有如下报道。 　　一、材料和方法 　　（一）动物分组 　　健康雄性SD大鼠24只，体重20～28g，国家标准啮齿动物饲料分笼喂养，每笼4只，自由饮水和进食，饲养环境为室温22～24℃，相对湿度40%～55%，自然光照。 大鼠适应性饲养3d后，随机分为3组：对照组、运动疲劳组、高压氧治疗组，每组8只。 　　（二）慢性运动性疲劳动物模型构建 　　采用Bedford据鼠体重/摄氧量回归方程式所建立的渐增负荷运动方式构建运动性疲劳动物模型（慢性疲劳共运动4周，每周6次），此法国际通用。 　　（三）高压氧暴露方法 　　此方法由解放军第九四医院高压氧仓中心相关专家及技术人员根据文献设计制定：小鼠置加压舱，纯氧洗舱10min，以0.01MPa/min的速率加至0.25MPa绝对压，高压停留60min期间以纯氧通风10min，使舱内O2浓度gt;98% ？熏CO2浓度lt;0.05%，舱内温度维持在22-24℃。暴露结束后，匀速减压15min至常压出舱。 　　（四）方法 　　1.取材、固定、切片：将动物用6%水合氯醛腹腔麻醉3.5ml/kg，经左心室插管，生理盐水冲洗后，用含4%多聚甲醛的0.1mol/LPBSpH7.2～7.6灌流固定。取脑后用Bouin液后固定24h，上行脱水后浸蜡，包埋，修块。用RM2025组织切片机Leica公司将蜡块切成4ktm厚的切片，贴片于用APES处理并标记过的载玻片上，在烘片机上烤干后，置于37℃烤箱中。 　　2.免疫组织化学染色：切片分别经3%H，O，和5%牛血清白蛋白BSA孵育处理后，3组切片滴加小鼠抗大鼠NGB单克隆抗体1：50，4℃过夜，滴加1：200以PBS稀释HRP标记的山羊抗小鼠IgG，室温30min，DAB显色。各步骤之间均用0.01mol/L PBS充分洗涤。上行脱水、封片、镜检。于QWin图像分析系统下摄片并保存结果。 　　3.显微图像分析及统计学处理：图像摄取后，用Qwin图像分析软件Leica公司对海马的NGB阳性锥体细胞进行吸光度测量。测量结果用SPSSll。 　　4.统计软件进行单因素方差分析，差异显著时，用Stu-dent-Newman—Keuls法进行两两比较，Plt;0.05为差异有统计学意义。 　　二、结果 　　高压氧可以让细胞的形态得到恢复，在研究中，小鼠经过高压氧治疗后，其缺血情况有了很大的改善。运动疲劳组以及高压氧治疗组的效果对比显示，高压氧组的小鼠其治疗效果比较厚，两组小鼠的胞核和胞浆内均有表达。研究结果显示出，高压氧对于缺血性脑卒中的治疗效果比较好，而且具有保护作用，让脑部的脑血红蛋白能够获得很大的改善，这是临床治疗该疾病的一个有效机制之一。 　　三、讨论 　　缺血性脑损伤是因为氧气供给不足，让脑部的神经元受到严重的损伤，这是引起病发的主要原因。若是对缺血半暗区即时的进行恢复氧气供给，则能够最大限度的改善这部分脑细胞的死亡，防止神