改良Hodge试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌.docVIP

精品论文 参考文献 改良Hodge试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌 王苏 刘莹 张桂华 （中国医科大学附属一院鞍山医院检验科 辽宁鞍山 114012） 　　【摘要】目的 用改良Hodge试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌，初步推测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的流行情况。方法 筛选2011年-2012年对碳青霉烯类抗生素耐药以及敏感性下降或者碳青霉烯类抗生素敏感而一种以上三代头孢菌素耐药的肠杆菌科细菌20株，用改良Hodge试验检测其碳青霉烯酶。结果 20株菌中15株呈多重耐药，其中2株菌改良Hodge试验阳性，分别为肺炎克雷伯菌1株，大肠埃希菌1株。结论 改良Hodge试验阳性提示所测菌株中有产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌存在，因此要加强对此类细菌的院内感染管理监测。 　　【关键词】 碳青霉烯酶 肠杆菌科细菌 改良Hodge试验 　　【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）32-0104-02 　　碳青霉烯类抗生素被认为是目前临床上控制革兰阴性菌感染最有效的抗生素，而耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的出现给临床治疗带来了极大的困难。本文对临床标本分离的疑似产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌，用改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型检测，观察其中是否存在产碳青霉烯酶细菌。 　　1 材料与方法 　　1.1 菌株来源 本院2011年-2012年肠杆菌科细菌非重复株20株，其中肺炎克雷伯菌9株、臭鼻克雷伯菌3株、大肠埃希菌5株、阴沟肠杆菌3株，为亚胺培南、美罗培南中介或耐药；或亚胺培南、美罗培南敏感，但有一种以上三代头孢菌素耐药。 　　1.2 用ATB expression细菌鉴定仪对20株进行确证鉴定及药敏试验，试剂均为配套试剂；结果解释参照CLSI2010判定。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853。 　　1.3 改良Hodge试验 配制0.5麦氏浊度大肠埃希菌ATCC29522菌液，用无菌生理盐水1：10稀释后均匀涂布于M-H平板上，待其干燥3～5min。于平板正中央贴10mu;g/片美罗培南纸片，用接种环挑取待测菌，从纸片边缘向平板边缘划直线，经35℃培养过夜后判定结果。大肠埃希菌ATCC29522标准菌株与待测菌株抑菌环交汇处矢状生长者为阳性。阳性质控株为产KPC-2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌，阴性质控株为肺炎克雷伯菌ATCC700603。 　　2 结果 　　2.1 药敏结果 20株菌中有18株呈多重耐药，多重耐药率达90.0%。见表1。 　　表1 20株筛选菌药敏结果 　　2.2 改良Hodge试验结果 20菌株中改良Hodge试验阴性19株，阳性1株，为肺炎克雷伯菌1株（6号）和大肠埃希菌1株（16号）。 　　3 讨论 　　本研究中20株多重耐药菌有两株改良Hodge试验阳性，提示为产KPC酶菌株，是其对碳青霉烯类抗生素耐药或敏感性下降的原因所在。KPC酶在大肠埃希菌、粘质沙雷菌、弗劳地枸橼酸杆菌、阴沟肠杆菌等多种肠杆菌科细菌中被相继发现[1-3]。施德仕等建议，阳性结果需通过基因检测的方法进一步确认，所以最终确定是否为产KPC酶有待于进一步检测[4]。 　　碳青霉烯酶的产生主要与医院内克隆传播现象有关，与是否使用过碳青霉烯类抗生素没有直接对应关系[5]。所以，加强对此类细菌的院内感染管理监测,一经发现，应对其进行隔离治疗。 　　参考文献 　　[1]Tibbetts R，Frye JG，Marschall J，et al.Detection of KPC-2 in a clinical isolate of Proteus mirabillis and first reported description of carbapenemase resistance caused by a KPC bate-lactamase in P.mirabilis.J Clin Microbiol，2008，46：3080-3083. 　　[2]Sacha P，Ostas A，Jaworowska J，et al.The KPC type bate-lactamases：new enzymes that confer resistance to carbapenems in Gram-negative Bacilli.Folia Histochem Cytobiol，2009，47：537-543. 　　[3]Sheng ZK，Li JJ，Sheng GP，et al.Emergence of Klebsiella pneumoniae carb