有机磷农药对缢蛏phaeodactylum tricormatum消化腺超微结构的影响研究.pdfVIP

持久性有机污染物论坛2006暨第一届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集 有机磷农药对缢蛏(phaeodactylum 超微结构的影响 薛秀玲“2，袁东星2 (1．华侨大学材料科学与工程学院，福建泉州361021，；2．厦门大学环境科学研究中心，福建厦 门361005，串联系人，E—mail：xueling@hqu．edu．cn) 摘要：在实验室模拟缢蛏生长环境，研究结构、性质不同的两种典型有机磷农药(OPs)乐 果和三唑磷对滩涂养殖生物缢蛏的毒性效应。通过电镜观察乐果和三唑磷对缢蛏消化腺超微结构的 影响。结果发现：乐果和三唑磷对缢蛏消化腺超微结构的影响主要表现在对细胞核和各种细胞器(如 线粒体、内质网、高尔基体)的伤害。主要病变为：细胞核变形，核膜或凸起或凹陷，染色质发生 凝聚或边缘化；线粒体肿大，双层膜溶解，内嵴部分消失；个别线粒体内嵴完全瓦解，形成电子透 明区；粗面内质网水肿，核糖体部分脱落，片层结构水肿、囊泡化，严重者出现大的囊泡区；高尔 基膜囊水肿，膜溶解，高尔基小泡破裂消失。 关键词：乐果三唑磷缢蛏消化腺超微结构 I．引言 近年来，随着有机磷农药(OPs)在滩涂养殖中的频繁使用，污染事故常有发生。乐果和三唑 磷是极可能对滩涂环境造成严重影响的两种典型OPs。其理化性质相差很大，是研究OPs(强水溶 间带滩涂、埋栖型双壳贝类。有研究表明，鱼类某些特定的疾病和组织损伤是特定污染物毒理效应 的可靠生物指标【1】。 本研究通过对缢蛏消化腺超微结构的观察，研究OPs对缢蛏的毒性效应，初步揭示OPs对贝 类的中毒影响机制。 2．材料与方法 2．1缢蛏中OPs残留的萃取 缢蛏购自厦门龙海西边养殖区，一年龄。壳长4～6cm，体重4．5～6．59。以反渗透水冲洗缢蛏 外壳，取出软组织，用家用食物搅碎机搅碎、混匀，制成浆状鲜样，放入聚乙烯塑料袋内，封口， 速冻，待进一步处理。 将样品解冻，置于滤纸上让水吸干，准确称取10．09组织样品于80mL离心管中。然后依次加 入适量无水硫酸钠、0．5mL lOmg·L一1磷酸三丁酯和0．1mL10mg·L．1磷酸三苯酯。加15mL乙酸 上清液，倒入装有无水硫酸钠的漏斗，以少量乙酸乙酯洗涤漏斗，收集滤液于50mL收集管中，于 40C水浴中用氮气吹脱溶剂至约O．5mL，用乙酸乙酯转移入样品瓶，定容至1．0mL，气相色谱分析。 2．2气相色谱参数 u Agilem6890气相色谱仪：SPB．1701毛细管色谱柱，30m×0．25mm，涂层厚O．5m(美国Supelco 1．t 空气流速为t00mL／min；载气为高纯氮气，流速1．5mL／min；无分流进样，进样量1．0L。 330 持久性有机污染物论坛2006暨第一届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集 时间为10。24min。 持6min；乐果的保留时间为6．62rain，替代物磷酸三丁酯的保留时间为5．58rain。 2．3 电镜样品的制作与观察 OPs污染的第14天，采样测定缢蛏体内OPs的含量。同时取乐果、三唑磷污染的缢蛏解剖， 仔细分离出鳃和消化腺，用2．5％的戊二醛溶液在4C下固定保存，1％的锇酸溶液双固定，2％的醋 酸双氧铀块染，乙醇逐级脱水后，环氧树脂618渗透包埋，超薄切片厚度为50--70rim，饱和醋酸 铀和柠檬酸铅双重染色，晒M一100CXII型透射电镜观察并拍照。 3．结果与讨论 3．1有机磷农药对缢蛏消化腺细胞核形态的影响 对照组的鳃细胞核正常，形状规则，核膜清晰可见，核中有异染色质，常染色质均匀附着于核 内膜，见图版I(1)；OPs暴露下，细胞核核膜水肿，甚至溶解，核内染色质明显固缩，染色质 发生边缘化凝聚，见图版I(2、3)。这与很多文献报道的结果一致，如Areechon等【2】报道马拉 硫磷处理斑鲴后，肝细胞呈现囊泡化；Medda等【3J发现磷胺胁迫下，南亚野鲮出现肝细胞液泡化和