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.论著.
干扰磷脂爬行酶1基因表达对结直肠癌
细胞增殖和粘附的影响
崔伟 袁强 陈彩玲陈纲 李世拥
【摘要】 目的探讨PLscRl在结直肠癌细胞增殖和粘附过程中的作用。方法常规培养3株
结直肠癌细胞,采用免疫细胞染色和免疫印迹法筛选PLScRl高表达的细胞株。设计三条RNA干扰
片段及一条阴性对照片段,稳定转染高表达P塔cRl的结直肠癌细胞株,采用实时荧光定量PcR和免
疫印迹法验证干扰结果,筛选出对PLsCRl蛋白抑制率最高的干扰片段,通过M|rr方法来评估转染后
结直肠癌细胞增殖能力的变化,采用细胞粘附实验来评估转染后结直肠癌细胞粘附能力的变化。
结果免疫细胞染色提示LoVo细胞株高表达PLSCRl,与免疫印迹法结果相一致;转染siRNA一390
后,L0vo细胞株PIscRl的mRNA抑制效果最为明显,抑制率为88.4%,免疫印迹法检测进一步验
证siRNA.390片段抑制PLscRl蛋白表达最为显著。M1Tr法、纤连蛋白,粘附和层连蛋白检测显示,
siRNA一390干扰下调PLsCRl的表达后,细胞生长变缓,粘附能力下降。结论干扰PLSCRl能显著抑
制肿瘤的增殖和粘附能力,提示PIsCRl可能在结直肠癌浸润和转移中具有一定作用。
【关键词】结直肠肿瘤;基因表达;RNA干扰;细胞增殖;细胞粘附;磷脂爬行酶l
hInuenceof PLSCRJ RNAintemrence蚰the adh鹤i帆of
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To theeffectofPLscRlonthe andadhesionof
【Abst腿ct】objec廿veinvestigate pmlife阳tion
colorectal ThreestrainsofCRCcellswerecultured.711}lecellswiththe
eancer(CRC)cells.ⅣIethods
of werehan,estedfor
PLSCRl immunocytochemistry
expression subsequentapplicationsincluding
highest
and ThreesiRNA PLSCRlwere
Westem-blotting. oligonucleotidetargeting desigIled.
staining segments
behaViorsthe
Successfultransfectionwasco娟rnledrealti僦PCRand of
by westem-hlotting.Thebiolo西cal
andadhesionweredeteHIlinedM‘ITr ResultsLoVocellsshow
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