干扰磷脂爬行酶1基因表达对结直肠癌细胞增殖和粘附的影响.pdfVIP

干扰磷脂爬行酶1基因表达对结直肠癌细胞增殖和粘附的影响.pdf

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‘47‘ 坚生萱窆睦垃述;堂苤查f亟王壁2垫!堡笙!!旦筮!鲞箜垒塑堡蝤!!生堕旦堕鱼塑!!盔娶塑型!垦堑婴2:燮型垫堡:!型:!:盥!:! .论著. 干扰磷脂爬行酶1基因表达对结直肠癌 细胞增殖和粘附的影响 崔伟 袁强 陈彩玲陈纲 李世拥 【摘要】 目的探讨PLscRl在结直肠癌细胞增殖和粘附过程中的作用。方法常规培养3株 结直肠癌细胞,采用免疫细胞染色和免疫印迹法筛选PLScRl高表达的细胞株。设计三条RNA干扰 片段及一条阴性对照片段,稳定转染高表达P塔cRl的结直肠癌细胞株,采用实时荧光定量PcR和免 疫印迹法验证干扰结果,筛选出对PLsCRl蛋白抑制率最高的干扰片段,通过M|rr方法来评估转染后 结直肠癌细胞增殖能力的变化,采用细胞粘附实验来评估转染后结直肠癌细胞粘附能力的变化。 结果免疫细胞染色提示LoVo细胞株高表达PLSCRl,与免疫印迹法结果相一致;转染siRNA一390 后,L0vo细胞株PIscRl的mRNA抑制效果最为明显,抑制率为88.4%,免疫印迹法检测进一步验 证siRNA.390片段抑制PLscRl蛋白表达最为显著。M1Tr法、纤连蛋白,粘附和层连蛋白检测显示, siRNA一390干扰下调PLsCRl的表达后,细胞生长变缓,粘附能力下降。结论干扰PLSCRl能显著抑 制肿瘤的增殖和粘附能力,提示PIsCRl可能在结直肠癌浸润和转移中具有一定作用。 【关键词】结直肠肿瘤;基因表达;RNA干扰;细胞增殖;细胞粘附;磷脂爬行酶l hInuenceof PLSCRJ RNAintemrence蚰the adh鹤i帆of silencing expr鲻i伽witII proUferati蚰and ceIIs colorectal伽cer cMi耽i,y眦nQio愕,饥en翰沈昭,∞e凡劬增,厶鼬咖ng.cen£er旷&聊mf o,&咖昭胁舭口∥commⅡndQ厂PLA,曰e咖增JDD7DD,饥讹 JSMrge∥,Ge凡er口f舶妒妇f £Dm秽谢i昭口掰幻r:“5是枷昭,砌蒯:b归;@J26.∞m To theeffectofPLscRlonthe andadhesionof 【Abst腿ct】objec廿veinvestigate pmlife阳tion colorectal ThreestrainsofCRCcellswerecultured.711}lecellswiththe eancer(CRC)cells.ⅣIethods of werehan,estedfor PLSCRl immunocytochemistry expression subsequentapplicationsincluding highest and ThreesiRNA PLSCRlwere Westem-blotting. oligonucleotidetargeting desigIled. staining segments behaViorsthe Successfultransfectionwasco娟rnledrealti僦PCRand of by westem-hlotting.Thebiolo西cal andadhesionweredeteHIlinedM‘ITr ResultsLoVocellsshow

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