甲基化干预对小鼠大肠癌生长及p16CDKN2基因表达的影响.pdfVIP

·2362· ．基础研究． 甲基化干预对小鼠大肠癌生长及p16／CDKN2 基因表达的影响 方晓明 姜朝晖姚宁 丁小文 彭佳萍郑树 【摘要】 目的探讨甲基转移酶抑制剂5-氦-2’脱氧胞苷(5．Aza—cdR)对小鼠大肠癌发生发展的 mRNA表达的关系。方法40只雄性KM小 影响及其与细胞周期依赖性激酶抑制凶子p16／cDKN2 鼠按随机数字表法随机分为2组：1，2一二甲肼(DMH)诱癌组和甲基化干预组，每组20只。小鼠皮下 25 注射DMHmg／kg，每周1次，连续22周，以诱发小鼠大肠癌，甲基化干预组于12周开始皮下注射 5．Aza．cdR。另选同来源雄性KM小鼠作为未诱癌对照组(阴性对照组)10只，于皮下按25mg／kg注 射生理盐水，每周1次，连续22周。“席卷法”收集肿瘤组织，HE染色观察肿瘤发生的数目、类型及 浸润程度；免疫组织化学染色观察细胞增殖核抗原(PcNA)蛋白表达情况；原位杂交技术检测肠癌组 mRNA的表达。结果 织抑癌基凶p16／CDKN2 (1)DMH诱癌组肿瘤数达(7．6±3．1)爪／只，而甲基 化干预组诱癌数为(3．4±1．8)个／只，且以重度异性增生为主，浸润癌的发牛率明显低于DMH诱癌 组(PO．05)。(2)DMH诱癌组19只小鼠中PCNA阳性表达16只，明显多于甲基化干预组(19只中 交信号(蓝紫色)，主要位于胞质，但甲基化干预组染色显然较DMH诱癌组强，尤其以瘤灶部位明显。 结论早期5．Aza．cdR的干预能显著抑制小鼠大肠癌的发生发展，其抑制肿瘤机制可能是通过激活 抑制因子p16／CDKN2的表达。 【关键词】 甲基化； 肠肿瘤； 原位杂交； p16／cDKN2 嗽b0f of∞lor∞tal咖∞rinm伽鼬andme跏订舶 5-A髓-2’-d∞珂c娟dine∞me傀rci肿妒n鹤is of InI悄AM^『c Z危∞-^撕，¨DM，|g，D删GX玉∞一雠n， expressionp16／CDKN2 X＆lo-蒯ng‘，肌^『G PENGji8·p讯g，zHENGsh‘Dep叭啪m《Gem谳sWgery。N谯n7Hosp蹦《PtA，Hd鸭zhou3lool3， (冼讥口 co胞印，ld打lg口u￡^or：班删vc鼽u，胁t如妇矿0，啪妞_y，Go如鲈旷肘8舭妇，z蛔施，|gUn觇巧蚵， edu饥 胁l，毛gzlIlou3J00D9，C蛔m，E梳订：如，l伊h@习U tIIe of 5·Aza- eⅡ＆协帅d 【Abstract】obj∞6ve’roexplore relationshipspecificdemethyIationagent 2’一d∞xycytidine(5一A嬲．CdR)帅colorectalc蚰cer(CRC)inducedbyl，2-dimethylhydE缸ine(DMH)in m叫舱明dthein私矗，D kinas船inhibitormRNA．MethodsA cyclin-dependent expressi佣of p16／CDKN2 0f40 were姗domizedinto2 cRcw船induceda22．w∞k of total maleKMlIlice gmups帅d by injection DMH．0new鹊inte血red DNA inhibitor5一A盟一CdR．AnotherlOthe group byspecificme山yItmnsfe瑚e s姗e鲫ume—eKMmicewer；einduceda22一w∞k sa