柱前衍生高效液相色谱法测定通络下乳口服液中牛磺酸的含量研究.pdfVIP

第25卷增刊 分析测试学报 VoL25 2006年i1月 FENXICESHI ofInstrumental NOV．2006 XUEBAO(JournalAnalysis) 柱前衍生高效液相色谱法测定通络下乳 口服液中牛磺酸的含量 黄岛平，陈秋虹，劳燕文 (广西分析测试中心，广西南宁530022) 通络下乳口服液是由鸡血藤、章鱼(干)、木瓜、通草等8味中药经提取、精制加工制成。具有益 气补血、通络下乳功效。用于改善妇女产后气血虚弱引起的无乳、少乳、乳汁清稀等症。口服液含有 的牛磺酸作为质量控制指标。牛磺酸又称牛胆碱(taurine)，其化学名为2一氨基乙磺酸，以游离形式 存在。目前测定方法是柱后衍生离子交换色谱法，需要氨基酸分析仪等专用仪器，价格较贵、运行成 本较高，不适合一般实验室分析。有关柱前衍生高效液相色谱法测定牛磺酸含量已有资料报道，但邓 思珊等人…采用梯度洗脱测定，费时较长；国家现行标准[21中，流动相为甲醇一乙腈一水(体积比 10：10：80)时牛磺酸很难洗脱。本文在综合前人的基础上进行改进，方法具有简便快速、结果准确等 优点。 1 实验部分 1．1仪器与试剂 美国Waters2695高效液相色谱仪及色谱工作系统，Waters2996二极管阵列检测器。 钾，磷酸氢二钾，乙酸钠，氢氧化钠，硼酸均为分析纯；牛磺酸对照品(Sigma)，通络下乳口服液 (广西中医药研究所制药厂)。 衍生试剂：称取0．1 OPA用10 g mL甲醇溶解，加0．1mL乙硫醇，0．4moL／L硼酸钠缓冲液(pH 9．4)定容至100mL。 标准溶液：准确称取牛磺酸对照品30 mg置50mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即为含牛 磺酸0．600 mL放入50 g／L的储备液；取储备液2．5 mL容量瓶中。加水稀释至刻度，摇匀，即得含牛 磺酸30．0mg／L的工作液。 样品溶液：精密吸取口服液2．5mL于50mL容量瓶内加蒸馏水定容至刻度。 1．2 色谱条件 x250 mol／L 色谱柱C培(SymmetryShield，4．6 NaAe溶液(体 mm，5p,m)；流动相：甲醇一0．05 积比45：55)，流量：1．0mL／min；检测波长330 nm。进样体积10斗L。 1．3样品测定 精密吸取牛磺酸工作液0．5mL，衍生剂0．5mL摇匀，在4min内取混合液lopL注入色谱柱内， 记录标准和样品峰面积，由峰面积外标法定量，测定结果见表l。 表1样品测定结果 2结果与讨论 2．1衍生剂的选择 目前柱前衍生色谱法所用衍生化试剂有2，4一二硝基氟苯口】、OPA…等，选用OPA实验条件最简 便。曾试验了OPA用量为1、2和5g／L，和乙硫醇加入量0．1％、0．2％、0．4％的情况。结果含OPA 1 s／L和0．1％乙硫醇就能满足实验要求，溶液在室温下放置3d不影响测定。不加乙硫醇时，OPA溶 解度差，说明乙硫醇有助溶作用。 一141— 第25卷 分析测试学报 增刊 2．2流动相的选择 根据有关文献资料H引，由去离子水、0．05 溶液与甲醇调成不同比例进行试验，在体积流量为1mL／min下，0．05mol／L乙酸钠溶液一甲醇(体积 腈可改变出峰时间，但乙腈毒性大，本实验不选用。