节律基因Clock干扰对小鼠精子受精能力的影响.pdfVIP

四川大学学报‘医蓄版’Scj …。’ 。929—932……。 SichuanUniv(MedEdi) 节律基因Clock干扰对小鼠精子受精能力的影响* 蒋小辉1’2，张路1’2，汪宇辉1，刘延友1，江舟1，王正荣1△ 1．四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程实验室(成都610041)，2．成都中医药大学第二临床医学院 【摘要】 目的 通过干扰小鼠睾丸圆形精子期节律基因Clock的表达，研究Clock对雄性小鼠精子受精能力 的影响。方法小鼠睾丸注射Clock干扰质粒，WesternBlotting检测注射后睾丸组织Clock表达的变化．体内实验 观察注射干扰质粒前后引起雌鼠胎仔数变化，体外实验观察精子数量、精子活力、体外受精率以及对顶体发育的影 响。结果Clock干扰质粒使小鼠睾丸CLOCK蛋白的表达明显下调．体内实验结果显示注射Clock干扰质粒影响 了雄性鼠致雌鼠的胎仔数，体外实验结果显示，虽然注射Clock干扰质粒后精子计数、精子活力无明显变化．但体 外受精能力明显下降．顶体酶活性明显下降。结论节律基因Clock与雄性小鼠的生殖功能有密切的关系．节律 基因Clock可能通过调节顶体酶活性来影响雄性小鼠精子的受精能力。 【关键词】Clock基因圆形精子顶体 顶体酶活性精子受精能力 RNA干扰 【中图分类号】R966，Q789 TheInfluenceofCircadianClockGeneonMouse inRNAi3lANGXiao-hui，ZHANGh· SpermFertility WANG Zhou，WANG ofBiomedical Yu·hui·L彤Yan—you-JIANGZheng—tong△．DepartmentEngineering· WestChinaSchoolPreclinicalandForensic of Medicine，Sichuan 610041，China University。Chengdu To theinfluenceofcircadianClock onthefertilizationof via [Abstract]Objectivestudy gene abilitysperm the ofClockwithRNAiinmalemice．MethodsAfterthe ofRNAi into attenuatingexpression injection plasmid micetestes·the ofcircadianClock oftestistissuewasdeterminedwestern expression gene by Blotting．The fertilizationof wasevaluatedvarious littersizeinmatedfemale abilitysperm by indices，including mice。sperm vitrofertilization(IVF)rateandacrosome TheRNAi count，spermmotility。in development．Resultsplasmid circadianClockattenuatedthe ofCLOCKinmice invitrofertilization targeting gene expression testis，reduced andthe (IVF)rate rateinvivo，andal