绵羊抑制素shRNA慢病毒干扰载体的构建与鉴定.pdfVIP

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2018-01-03 发布于北京
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绵羊抑制素shRNA慢病毒干扰载体的构建与鉴定.pdf

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● 0 T - ●-RICULTU¨E 华北农学报·20ll，26(3)：2l_27 -●哪U·ImIC- 绵羊抑制素shRNA慢病毒干扰载体的构建与鉴定张瑞杰，苗向阳 (中国农业科学院北京畜牧兽医研究所。北京l∞193) 摘要：构建并鉴定了针对绵羊抑制素d亚基(脚)基因的shRNA(smallhairpinRNA，8hRNA)慢病毒干扰载体，瞬时共转染293T细胞，qPcR法进行干扰效果筛选，挑选干扰效果最佳的shRNA干扰载体构建成慢病毒干扰载体。表明其已建成功。绵羊删shRNA慢病毒干扰载体构建成功，为进一步制备优质高繁转基因绵羊奠定了基础。关键词：抑制素a亚基；慢病毒；小发夹RNA；RNA干扰；绵羊中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：1000—7091(2011)03一0021一07 ConstructionandIdentificationofaLentiViralVector shRNA Expressing forRNAInterferenceInhibin Sheep AlphaSubunit(INHA) ZHANG Rui-jie，MIAO Xiang—yang ofAnimal of 1001 (Institute Sciences，ChineseAcademy 93，China) Agricultu舱Sciences，Beijing for constmctalentivimlVector shRNARNAinterferenceof inhibin8ub— Abstract：To exp陀ssing sheep alpha andassessits effbctin293TceUcotransfectedwithan unit(INHA)genegenesilencing by e妇ficientlyexpressional INHAVectorconstmcted Make for and 8imultaneously．preparationproducinghighqualityhigh and 4shRNA 2control sheep．Designsynthesi8 expressing thenattachthemtoablank 4 8equences(NCl，NC2)flor8heepZ^嘲gene，and plasmid shRNA is8hRNA and2 controlvector Vector(that expres8ing interferingVector)pGFP—V—RS—shRNAsnegative pG- FP—V-RS-NCswere Atthesame constmctan vectorof 删 genemted；