桃蛀果蛾Carposina+sasakii复合体的AFLP分析研究.pdfVIP

摘 要 桃蛀果蛾复合体。rposinasasakiiMatsumuracomplex危害多种果树，是重 要的果树害虫。因此深入研究其分化机制和状态，对于生物进化理论的丰富和物 种的正确划分具有重要的理论意义，对于该害虫的综合防治措施的制定具有重要 的现实意义。 本研究利用AFLP技术，对苹果Maluspumila、海红Masiaticavar.rinki、桃 Prunuspersica、杏Parmeniaca、枣Zizyphusjujuba、酸枣Z.spinosus、山植 Crataeguspinnatifida.7个寄主上的桃蛀果蛾种群以及山茱英蛀果蛾C.coreana Kim种群进行了亲缘关系分析，并建立了适合桃蛀果蛾AFLP分析的方法。 从常用的5对内切酶组合中选择Tagl/Pstl内切酶组合，对桃蛀果蛾基因组 DNA进行酶切，结果表明，Tagl/PstI适用于作为桃蛀果蛾AFLP分析的内切酶。 从15对选择性引物组合中筛选出10对具有良好多态性的引物进行了AFLP 分析。用这10对选择性引物组合，共扩增出771条清晰的条带，平均每对引物 扩增出77.1条带。其中多态性条带741条，平均每对引物扩增出74.1条，多态性检 出率为%.1%。不同寄主上桃蛀果蛾种群的扩增条带数不同，扩增条带数以杏种 群最多，为437条，扩增条带数最少的是海红种群，为250条。其它依次为桃种 群406条，枣种群402条，苹果种群394条，酸枣种群284条，山檀种群338 条，山茱英蛀果蛾种群255条。 利用NTSYS-pc2.1分析软件计算了10对引物组合各自在8个寄主桃蛀果蛾 混合DNA池之IBJ的遗传距离，得到UPGMA和殉法聚类图。另外，对10对引 物进行了总体分析，得到其平均遗传距离，利用UPGMA和Nj法构建了桃蛀果 蛾复合体的系统进化树。亲缘关系分析表明:苹果种群与桃种群亲缘关系最近， 与其它种群亲缘关系依次为:枣种群、杏种群，山植种群、酸枣种群、海红种群、 山茱英蛀果蛾种群。苹果种群、桃种群、枣种群和杏种群亲缘关系较近，与其它 4个种群的亲缘关系较远。使用SPSS软件分析时，采用NTSYS软件相同的相 似系数和聚类方法，系统进化树与N丁SYS软件分析结果一致。 关键词:桃蛀果蛾复合 AFLP 亲缘关系 物种分化 Abstract Thepeachfruitborer,CarposinasasakiiMatsumuracomplex,isanimportant fruitpestinChina,Korea,andJapan.Itcancauseseveredamageonmanykindsof fruittrees,suchasapple,peach,apricot,commonjujube,hawthorn,wildjujube. Inthisstudy,sevendifferenthostracesinfestingvariousfruittreesincluding apple,peach,apricot,commonjujube,hawthorn,wildjujube,Malusasiaticavar.rinki andoneoutgroupdogwood,wereusedtostudythegeneticdistanceandrelationship ofC.sasakiicomplex byAFLP technique (Amplified FragmentLength Polymorphism).ProcedureforC.sasakiiAFLPanalysisisestablished. ThegenomicDNAfromtheeighthostraceswereextractedbymeansof improvedCTABrespectively.ThegenomicDNApoolwascomposedofthemixture ofthe8samplesfromdifferenthostraceswiththesamequantity.TheprovidedDNA wassuitableforAFLPanalysis. TagI/PstIwasselectedrfom fivedifferentcombinations.Thefingerprint thecombinationmee