桐柏野生大豆种子粗蛋白质含量的测定研究.pdfVIP

第 11卷第 l2期 南阳师范学院学报 V01．1lNo．12 2012年 12月 JournalofNanyangNormalUniversity Dec． 2012 桐柏野生大豆种子粗蛋 白质含量的测定 张乃群，丁妍妍，王 碌，贾津亚，韩 琼 (南阳师范学院 生命科学与技术学院，河南 南阳473061) 摘 要 ：为 了探讨野 生大豆蛋 白质含量 ，对产 自桐柏 的8个野 生大豆样 品采用半微量 凯氏法和 消化一 分光光度 法进行 蛋 白质含量测定．试验结果显示，两种方法测定的结果一致．半微量凯 氏法是适用范围广测定结果精确的经典方法 ，消化一 分光光度法相对于半微量凯氏法简化了试验操作，缩短 了分析时间，更便于普及应用． 关键词 ：野生大豆 ；半微量凯氏法 ；消化一分光光度法 ；粗蛋 白质 中图分类号 ：S52 文献标志码 ：A 文章编号 ：1671—6132(2012)12—0047—03 野生大豆分布在我 国从寒温带到亚热带的广 半微量凯 氏法测定蛋 白质分为试样消化、蒸 大地区，喜水耐湿 ，多生于山野以及河流沿岸、湿草 馏 、吸收和滴定 四个过程．其原理是样品中含氮有 地、湖边 、沼泽 附近或灌木丛 中 ¨．野生大豆 因其 机化合物与浓硫酸在催化剂作用下共热消化 ，含氮 高蛋 白、低油脂含量等特点，有很高的营养价值．其 有机物分解产生氨 ，氨又与硫酸作用 ，变成硫酸铵． 貌不扬 的野生大豆，蕴藏着各种可利用 的抗性基 然后加碱蒸馏放 出氨 ，氨用过量的硼酸溶液吸收， 因——如抗虫 、抗病、抗旱 、耐盐碱的基因等等 ，这 再用盐酸标准溶液滴定求 出总氮量换算为蛋 白质 些基因在大豆育种 中有很重要的价值 ，可以说决定 含量 ，方法依据 国家标准 GB2905—82 ． 了大豆产业的前途．因此 ，人们对野生大豆 的研究 消化一分光光度法是将试样 与浓硫酸 、硫酸 越来越多 ．大豆蛋 白质 的氨基酸组成与牛奶蛋 钾、硫酸铜混合加热破坏有机物质 ，使其 中的碳和 白质相近 ，是植物性的完全蛋白质 ，在营养价值上 氢分别变成二氧化碳和水逸出，蛋 白质脱氨并生成 与动物蛋 白等同．研究表 明，每天摄入 25g大豆蛋 硫酸铵 (同半微量凯 氏法 的消化过程)，其铵离子 白，有减少患心脑血管疾病的风险 ． 与碘化汞钾在碱性溶液中生成黄色络合物 ，比色测 目前测定大豆蛋 白质的常用方法主要有凯 氏 定铵离子 ，根据其含氮量和蛋 白质换算系数即可推 定氮法 、双缩脲法 (Biuret)、紫外 吸收法 、考马 算 出蛋 白质的含量 ． 斯亮蓝法 (Bradford)[4A、分光光度法 等．本研究 1．2．2 计算公式 采用国家标准 《谷类 、豆类作物种子粗蛋 白质测定 1．2．2．1 半微量凯氏法 法 (半微量凯 氏法)》(GB2905--82) 和消化一 粗蛋 白质 ％(干基 )= 分光光度法 测定野生大豆 的蛋 白质含量 ，进而 fVo一V．、×N ×0．0140 ×K ×100 J Xf1—00 X ～ 00 () 对两种测定方法进行比较 ，以期找到简便 、快速 、精 一 ) 一。 、 确的野生大豆粗蛋 白质测定方法 ，为桐柏野生大豆 式 (1)中：V和 依次是滴定空 白和试样时消耗 高蛋 白样本的发现和利用提供参考． 酸标准溶液的体积 (mL)，Ⅳ是盐酸标准液的量浓