低温喷雾干燥制备胰岛素缓释微球的试验研讨.pdfVIP

低温喷雾干燥制备胰岛素缓释微球的 试验研究 周伟伟，李保国 (上海理工大学，低温生物与食品冷冻研究所上海200093) 摘要：本文采用低沸点溶剂喷雾干燥法制备了胰岛素缓释微球，并从外观形态、粒径 分布、包封率、体外释放、热学特性等方面考察了微球的性能。结果表明，胰岛素微球粒径 分布较窄，具有较高的包封率，且该方法制备方便、生产效率高，易于实现工业化生产。 关键词：喷干法：微球：胰岛素 微球、毫微球技术是近年来研究最多的药物制剂技术，它具有延长药物作用时间，定向 靶位给药，减少药物毒副作用等优点，在现代药物制剂中受到了广泛的应用。作为糖尿病治 疗的特效多肽蛋白类药物胰岛素，由于直接口服容易失活并且在血液中的半衰期也很短，患 者需要频繁注射治疗，痛苦不堪。人们对于胰岛素微球、毫微球缓释制剂的研究进行了诸多 的探索【11。 目前胰岛素微球主要的制备方法有乳化分散法、凝聚相分离法及界面聚合法等。然而目 前的工艺大多存在制备过程繁琐复杂、生产效率低、包封率不能满足实际要求、无法实现工 业化生产等而受到了局限。本文采用低沸点溶剂喷雾干燥法制备聚乳酸羟基乙酸共聚物 (PLGA)的胰岛素缓释微球，该法具有生产效率高、影响因素少、不添加乳化剂、成本低、 易于实现工业化生产等优点，类似该法已成功制备出清蛋白微球，它将是实现微球工业化最 有希望的途径之一12J。本试验以胰岛素为药物模型考察了低沸点溶剂喷雾干燥法制备的胰岛素 微球粒径、包封率及释放等特性，并探讨了产业化的可能性。 1仪器与试药 UV-2401PC型紫外分光光度仪(日本岛津)：TJL激光粒度仪(上海精密科学仪器公司)； PYRISDiamond DSC差示扫描量热仪(美国Perkin．Elmer)；微型喷雾干燥机(山东科院天力)； AL3521 1-4467)； 2方法 2．1微球制备 先将一定量的PLGA溶入丙酮中，配成2％(W／v)的聚合物溶液；再按照胰岛素与PLGA 成1：20，1：25及1：30的比例分别混入聚合物溶液中配成A，B，C三组芯壁材混合液：然后 将混合液送入微型喷雾干燥机中，在雾化及气流作用下丙酮溶剂得以迅速去除，遂得到了A， B，C三组胰岛素微球，真空干燥2h后于4C保存待测。喷干机工作参数为：进风温度45*(2， 空气流量10L／min，进料量60ml／min，风机功率3kW。 2．2微球形态与粒径． AE3l倒置显微镜400倍下进行观察；微球粒径使用TJL激光测粒仪测定， 使用MOTIC 设定颗粒尺寸按Rosin-Rammler分布。 396 2．3体外释放测定 2．3．1标准曲线的确定 精密称取一定量的胰岛素，加入磷酸氢二钠缓冲液(pH7．4)后分别配制成0．02mg／ml、 扫描，结果表明214nm处有最大吸收，辅料无干扰。以吸光度(Y)为纵坐标，以浓度(C)作为 横坐标，得到标准曲线方程： Y=18．192X．0．0709， r2=o．9975，线形范围为20～120mg／L。 1 方程：Y=23．607X．0．082，r2_-o．9992。 2．3．2释放度测定 50次／rain， 每次取约20rag胰岛素微球分散于磷酸缓冲液(pH7．4)或人工胃液(pill．5)中， 后测定其上清液中胰岛素的含量。胰岛索累计释放量可按照以下公式进行计算。 累计释放率=(∑第n次取样时样品的浓度×溶出液体积)／胰岛素总量。 2．3．3包封率测定 收集微粒制备过程中的残留物，加入2ml二氯甲烷，有部分沉淀生成；加入5ml磷酸缓 冲液后，漩涡搅拌混合30min，3000r／min离心10min，然后测定其上清液中胰岛素的含量。 包封率按照下面公式计算。 包封率=(胰岛素投入量一游离胰岛素的量)／胰岛素投入量。 2．4 DSC差示扫描热分析 对胰岛素载药微球、胰岛素进行DSC测定，样品重约6mg，测试温度0～100。C，升温10 ℃／min。