体外暴露镉对长江华溪蟹肌肉组织细胞超微结构的影响研究.pdfVIP

中国甲壳动物学会编辑 甲壳动物学沦文鬃 第四辑 讲学士盥缸2003年出版 TRANSACTl0NSOF S(X：IETYNo．4 THECHINESECRUSTACEAN PP．491～496 体外暴露镉对长江华溪蟹肌肉组织 细胞超微结构的影响’ 韩小铮 王 兰 王 茜 王定里 郭 禹 (山西大学生命抖学与技术学院，太系030006，E．mail：Lanwang@，xu．edu．c。) 摘要：应用透射电镜技术。于200 L年9～1i月．研究了镉处理后5d、15d、30d时计长ir 华溪蟹(Sinopotamonyangtsekiense)叽肉组织细胞超微结构的影响。结果显示：经镉处理 之后的肌肉细目包产生了较为明显的变化，主要表现在细匏孩、线粒体和肌原纤维三神缩匏 器，细咆核形状不规则．核膜破损，异染色质聚集突出，核物质外流。线粒体融台变形． 基贡密度增大，嵴消失，膜破损．空泡化：肌原纤维随镉处理时间的延长逐渐出现澎胀． 排列错位，暗带不连续直至断裂： 关键词：长江毕溪蟹肌肉细咆超微结构镉 长江华溪蟹是淡水水域重要的无脊准动物，也是一类可带来一定经济效益的资源动 物，可用于水产养殖、医药、环保等领域中。近年来随着环境污染的加重，尤其是各种 重金属对人体的影响，环境毒理学研究日益引起人们的重视。镉作为毒性最大的重金属 之一，研究其对华溪蟹肌肉组织细胞的影响，无论是对人类自身缝康。还是对提高华溪 蟹的利用价值都有十分重要的意义。 一、材料和方法 1．实验材料 雄性长江华溪蟹于2001年5～6月购自太原市二营盘花鸟鱼虫批发市场，置实验室 水族缸中饲养。 氯化镉(CdCl2·2．5H2())为AR级。 2．实验方法 取60只平均体重为11．5±I．29且键康活泼的雄蟹。将蟹分为对照组和处理组，对 照组30只培养在自来水中，处理组30只培养在浓度为I．87mg／L的镉溶液中，每隔2 天换一次溶液，并投喂鱼饲料。分别在镉处理后5d、15d、30d三个不同时间段活体解 剖雄蟹，快速取出附肢中的肌肉，切成1mm3左右的小块，先放入2％戊二醛中固定 ·493· 2h．后放入1％锇酸中固定2h，丙酮梯度脱水，618环氧树脂包埋．瑞典LKB一5型超薄 切片饥切片，切片指示厚度50～70nm，醋酸铀一柠檬酸铅双重染色，日本JEM。100CX Ⅱ透射电子显微镜观察并拍照。 一 乡士 田 一、二日 木 J．镉对长江华溪蟹肌肉细胞线粒体的影响 镉处理5天后，线粒体形态多样，有的呈卵圆形，有的呈椭圆形；大小基本正常； 基质浓度较大，嵴形态多样，有断裂现象；部分外膜出现溶解(图1．1)。15天后，线 粒体有些融合在一起，形态不规则；基质密度增大；部分嵴断裂，排列杂乱无章；双层 膜溶解、破裂(图l一2)。30天后，在线粒体内不同位置均发生嵴断裂、模期甚至消失 的现象；基质密度降低，出现有空泡化。同时双层膜破裂(图1．3)。 2．镉对长江华溪蟹肌肉细胞细胞核的影响 镉处理5天后，细咆核的形态就有所变比，细咆核外膜部分消失(图1．4)。15天 后，细咆孩形状不规则拉长呈椭圆形；异染色质聚集成块，电子密度增大，在异染色质 中出现染色质问颗粒，并出现染色质问颗粒集结的现象，并且沿核周边分布；外核膜溶 解(图l，5)。30天后，细8色核的形状更加异常，扭曲并变形，向外伸出“沩足”；桉外 摸大部分破裂，核质外流；异染色质中的间颗粒增多。异染色质凝聚断裂，不均匀地分 布于细咆核中(图1-6)。 3．镉对长江华溪蟹肌肉细胞肌原纤维的影响 镉处理5天后，未发现叽原纤维有形态上的异常，明带和暗带排列均较整齐(图2— 7～8)：15天后，肌啄纤维发生细微变化，少数帆原纤维发生膨胀，排列不整齐；暗带 有的弯曲，有的不连续(图2-9～1