侧链羟基氨基酸保护工艺优化研讨.pdfVIP

H027 侧链羟基氨基酸保护工艺优化研究 李鑫 朱颐申 应汉杰 （南京工业大学，制药与生命科学学院，210009 ，南京） 摘 要 叔丁酯保护侧链羟基的 N-9-芴甲氧羰基(Fmoc)-氨基酸是在多肽固相合成中应用广泛的保护氨基 酸，本文研究了侧链带有羟基的丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的侧链保护合成工艺，着重对工艺进行了优化研 究，降低成本，提高反应收率。 关键词 氨基酸保护 侧链 羟基 工艺优化 OPTIMIZATION OF SYNTHETIC PROCEDURE OF PROTECTED SERINE, THREONINE AND TYROSINE LI Xin, ZHU Yishen, YING Hanjie (College of Life Science and Pharmacy, Nanjing University of Technology, Nanjing 210009, P. R. China) Abstract ： Some N-Fmoc-Amino Acids, whose hydroxyl groups are protected by tert-butyl group, are widely used in solid phase peptide synthesis (SPPS). It was studied to protect hydroxyl group of serine, threonine and tyrosine with tert-butyl esters. It focused on optimization of their protected procedures in order to get higher yield and lower costing. Keywords amino acid protection, side chain, hydroxyl group, procedure optimization 引言 随着人类进入后基因时代，生命科学对蛋白质的研究越来越广泛和深入，多肽合成已经成 为本领域的研究热点之一。氨基酸的保护是多肽合成中最基本、最重要的一环，尤其侧链带 有羟基氨基酸的保护。有文献报道，α-羧基用苄酯或对硝基 phenyl 酯暂时性保护起来，用 叔丁基将羟基保护完成后利用氢解的方式将α-羧基的保护基脱除[1] 。还有关于在叔丁酯化 的过程中用甲酯的形式保护α-羧基，用苄氧羰基作为α-氨基的保护基的报道[2]，在接肽反 应中需要用氢解的方式脱除苄氧羰基。用对酸敏感的叔丁基(tBu)保护Fmoc-丝氨酸、Fmoc- 苏氨酸和 Fmoc-酪氨酸侧链羟基的合成工艺，采用较温和条件下以甲酯作为α-羧基的暂时 性封闭基团制备 Fmoc-氨基酸叔丁酯的方法[3]，相对于上两种方法，它具有简捷、快速的优 势，便于规模化生产。众所周知，在固相多肽合成过程中是以过量保护氨基酸参与反应，而 侧链羟基的保护氨基酸市场售价极高，由此增加多肽的合成成本，因此对合成这类保护氨基 酸合成路线的优化就具有现实和长远意义。 1． 试剂和仪器 1.1 试剂 L－丝氨酸、L－苏氨酸、L－酪氨酸，中国医药集团上海化学试剂公司；9-芴甲氧羰基 琥珀酰亚胺，上海吉尔生化有限公司；异丁烯，南京 梅化化工厂；甲醇，上海陆都化学试剂厂；二氯甲烷 (DCM)，上海凌峰化学试剂厂；其 它试剂均为南京化学试剂厂。 1.2 仪器 HH －2 数显恒温水浴锅，常州国华电器有限公司；JJ －1 电动搅拌器，江苏金坛中大仪 器厂；SHB－III 循环水式多用真空泵，郑州长城料工有限公司；R －200 旋转蒸发器，瑞士 BUCHI 公司；磁力搅拌器，上海具曹行公社农机厂；XT4A 显微熔点测定仪，北京科仪电 光仪器厂；WZZ-2A 自动旋光仪，上海物理光学仪器厂。 2. 实验方法 2.1 合成路线和方法 a)NaCO3 or NaOH isobutylene