棉花种子水溶蛋白电泳及品种鉴定技术的研究与应用研究.pdfVIP

棉花种子水溶蛋白电泳法在品种鉴定 技术中的应用研究 摘 要 在棉花水溶蛋白AUG技术的推广应用过程中，发现该方法存在下 部谱带不清晰的缺点，为了解决这个问题，本研究以鄂杂棉 1号、鄂杂棉3 号、鄂杂棉4号、鄂抗棉6号、鄂抗棉7号、鄂抗棉9号、鄂抗棉10号、鄂 抗虫棉1号、新棉33B等9个品种19个样品进行了以下试验: (1)对棉花水溶蛋白电泳系统的凝胶储液中的离子类型、浓度进行了研 究，以NaAc代替甘氨酸，降低凝胶系统的阳离子浓度，确定以2%Hac+0.4%Nac 作为调整后新的电泳配方，取得了非常好的效果。 (2)对水溶蛋白的提取过程中的水浴温度、时间进行了优化，结果表明 当水浴温度为60口、水浴时间为30min时，种子蛋白质的提取效果最佳。 (3)针对棉花种子的饱满程度对电泳结果的影响进行了研究，结果表明 种子饱满程度与否不影响电泳结果。 (4)对酸败种子的电泳结果进行了研究，结果表明酸败种子对电泳结果 有影响，电泳时应首先除去酸败种子。 最终将优化后的棉花水溶蛋白电泳定名为AUS法，以替代 AUG方法应用于棉花种子纯度快速检测，检测结果与棉花田间形态鉴 定结果存在显著正向相关关系，说明采用AUS方法检验棉花品种纯度， 具有快速有效、简单易行和可靠性高等特点，此方法有较好的实用价值。 关键词 棉花种子;蛋白;电泳;品种鉴定 AppliedResearchonIdentificationof CottonCultivarswithElectrophoresisof SeedWaterSolubleProteins Abstract ThedisadvantageofAUGisthattheelectrophoreticmapofcotton seedproteinsisnotclear.Tosolvetheproblem,severaltestshadbeenengaged withthedifferentcottoncultivarssuchasEzamianl,Ezamian3,Ezamian4, Ekangmian6，Ekangmian7,Ekangmian9,Ekangmianl0,Ekangchongmianland Ximnian3313: (1)Theeffectofdifferentionsandtheirconcentrationsinthegelof AUGonseparationofcottonseedwatersolubleproteinshasbeentested. Thebetterseparationhasbeenreachedwiththemodifiedgelstocksincluding 2%Hac+0.4%Nac,whichhasalowerintensityofcationsbyreplacingtheglycine inAUGwithNaAc. (2)Theoptimizedprotocolforisolationofcottonseedwatersolubleproteins is60口for30mina (3)Thereisnosignificantdifferenceofelectrophoreticmapsbetweenthe fullandhalf-fullcottonseedso (4)Theacidifiedcottonseedschangedtheelectrophoreticmapsalot comparedwiththenormalseedsandshouldberemovedbeforetheelectrophoresis. Wecalledouroptimizednewprotocolforcottonseedwatersolubleproteins electrophoresisAUS.AUShasabetterseparationofcottonseed proteinscomparedwithAUG,whichcanbeusedtoquicklyidentifythe purityofcottoncultivars,becausetheresultsbasedonAUSshow