植物染色体倍性鉴定研究.pdfVIP

植物染色体倍性鉴定 洪林魏召新 重庆市果树研究所。重庆，402260 美犍词技物学袭色体瞎性鏊定 俯性育种是植物品质改良的敷要途径，逶避花缝培养、诧学诱变、胚乳持漭等方法获得的后代往往 是不同侬性水平缀成瓣混合群俗，包含有单倦体、兰估体、网源四倍体及更高俯性的种质，从后代群体中 筛选有效的因标种质|瞧为关键技术闷题，因而研究快逢、筒单、准确豹嵇性鉴定方法可缩短、简化育种过 程．另外，植物基医组原位杂交、核型分析等研究巾也要进行大晟的经性臻定。倍性鉴建在榱物分类、 地理分裙及遗传多样性骈究中也起重娶像用。国内外巳报道过的鉴定方法较多，涉及的物种繁多，包括 被子毯物、蕨类植物、菌类等，但缺乏系统研究，其中以流筑纲胞术(FCM)应溺相传统染色体计数两种 方i畚为圭，但方法都不够完善，适用范围不广．作者通过对凰内外的砑究成聚的总结，分析其利弊。旨在 为科研和生产提供菝余薅的参考依掰． 一、染色体直观研究 (一)染色体计数 最可嚣、墩直接的鉴定苇段，实验中染色方法也较多t铁一醋酸洋红、孚尔撮染色法、去肇低渗法等o】 一般采用进行染色体标本制镑，此方法也是染色体梭型、分带技术磺究的基础，通常选择掇尖、茎尖、卷 倍性，李唯簿用擎宝红染色法对蔼镩花药培养卮代群体进行报尖染色体计数，常金华秘3等通过研究认为 利用卷矮积蒸尖染色体计数霹有效鉴定圆倍悸玫瑰香葡莓多倍体变异榱掾。伊华林“3等报港了铁研r 苏木猿法鉴定柑橘有性后代的染色体变异水平．宋娟娟湖等采用去壁低渗火焰千燥法避符染色体涮片 观察木槿属几种植物的染色悸数目及其傣性． (二)染色体形态 不润品乖l|厦同一品种不同倍性之间的染色体形态上存在一定约差异．拣黄瓜、黄芩孽倍体，双单倍 俸、三倍体的研究中发现染色体中心直径和弊染色质数目均存在差异，认为舁染色质效目可作为鉴定其 倍性‘¨]。 染色体计数和染色体形态签定法精礁、珂靠、成本低。组不同物种的絷色体数目呈现很大的差异， 从几条列几千条，凰需要掌握熟练的细胞学操住技水、较费时． =、流式细胞术(FIowCytometry，F(M)分析法 FCM是一种快速、简单、准确地检浏接物倍性构方法，其原理是用染色剂对缨胞进行染色后测定样 厦映出不同倍性水平的细胞胼占比例．FCM法已甩予甜菜、洋葱、小麦、蠢豆、欧洲桷寄生、豌盥、花揶 ·16· 橘愈伤组织的遗传变异[”．Brumm盯E 定速度恢。流式绷腑术在医学研究得列广泛应用． 三、植株形态差异 染色体多倍化引起纂因剂量效廒，调节基因的袭达燮化，在二倍体物种中已经发现与纯合纂因毅等 位纂因的高表达量与或低表达量相比，等位剂量效应在杂会纂因型中表达为中等水平，但俯性变异后的 削孱效应与基因表达的关系还未进行广泛研究，但能解释一些稳定多倍俸中观察到的熏复的基因能够 商水平^}l壁保持其功能的现象n”．多倍体与=倍体花耪性状的麓异已在葡萄、枣，扳浆、苹果等诈多棱物 研究中褥捌珏实，多倍体常产生大小不等且形状备髡的花粉粒，叶长、叶宽、咔面积增大，叶形也发生变 化但霓规德。通常多倍体叶的叶形指数趋于变小。誉赞n们等比较了苹槊10个=倍体和5个三倍体品 种的花粉大小、彤状及分布，发现三角澎花粉粒数目与圆形花粉辍及方形花粉粒数目之和的比假与倍住 存在相关性，取德1．2可区分二倍捧和三倍体．划文革【1目簿采用扫描电予显微镜对不同倍性两瓜12 粉、牯连花粉和空瘪花粉等；三倍体诧粉垒部为空瘪花粉．这也从狍耢学角度朗述了硝储体花粉萌发率 及蕊干厚度也比=倍体大，且生长速率较快。通过比较植拣的叶片、花、花粉、果实的形态学上的豢异采 辨别倍燃，快速而直燧，毽蕊受植物生长发霄时期的影响。 四、气孔 不闷倍性植物由于其代谢强弱不同造成组织形态和功能上的差异，如气孔长窕、气孔密度、保卫细 胞哇绿休数、气孔器长辆和短轴等的差晁．耳前不少学者通过构造数学模獭来寻找并建纛絷色体倍住 水平与气孔鬃化指标的函数关系，探索两者之问的相关性。由于染急佟加倍，Ⅱ{’绿俸基因维表达相应增 加，胞质中翦质体较多发育残盼绿体，使气孔保卫细胞中叶绿俸数目与俯性存在相关性，张凌媛[17】等通 避对16个枇把二倍体和灭然多倍体晶种的气孔保卫细胞叶绿体数掰，研究确定了以16为临界值判别 二倍体与多倍体。李赞H叼等利用气孔的长宽、叶绿体数目、气孔密度四个捂杯研究了梨和苹果倍性t气 中是可行的，