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第五章 质谱 Mass Spectrometry Spectrometry NOT Spectroscopy Spectroscopy n. 光谱学, 波谱学, 光谱仪 Spectrometry n. 度谱术，质谱计 Spectrometry : Spectrometer Abbreviated to: Mass spec. or MS 1. 特点 质谱计构造:真空系统 离子源和质量分析器的压力在 10–4 ~ 10–5 Pa和10–5 ~ 10–6 Pa。 大量氧会烧坏离子源的灯丝； 用作加速离子的几千伏高压会引起放电； 引起额外的离子－分子反应，改变裂解模型，谱图复杂化。 进样系统 在不破坏真空度的情况下，使样品进入离子源。 气体可通过储气器进入离子源。 易挥发的液体，在进样系统内汽化后进入离子源。 难挥发的液体或固体样品，通过探针直接插入离子源。 离子源 质量分析器 一、进样方式1.直接进样 Direct insertion probe Conceptually very easy, practically very tricky 2. Gas Chromatography-MS (GC-MS) GC output to mass spectrometer Sample already in gas phase 3. Liquid Chromatography-MS (LC-MS) Direct infusion of sample in solution Syringe pump: slow steady infusion Output from HPLC Separation and identification of components Vast majority of solution is solvent Must remove solvent to “see” analyte Historically: extra pumping and heating Applicable to electrospray ionisation ESI: see later 二、离子化的方法 1.电子轰击电离 Electron Impact （EI） 2. 化学电离（Chemical Ionization，CI） 4. 快原子轰击Fast Atom Bombardment（FAB） 5. 基质辅助激光解析电离Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization (MALDI) ③ 其他类型质量分析器 1. 质谱图主要离子峰类型 4）亚稳离子峰 离子m1 在进入质量分析器之前发生裂解，失去中性碎片，形成子离子m2，即m1?m2+△m；此时的m2离子比在离子源中形成的m2离子能量小，故将在磁场中产生更大的偏转，观察到的m/z 较小，这种峰称为亚稳离子峰，用m*表示。它的表观质量m*与m1、m2的关系是： m* = （ m2 ）2 / m1 亚稳峰的特点： 峰弱，强度仅为m1峰的1%～3%； 峰宽，一般可跨2～5个质量单位； m/z一般不是整数； 原理：是用激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜，基质从激光中吸收能量传递给样品，从而使样品解吸和电离的过程。它是一种软电离技术，适用于混合物及生物大分子的测定。 Schematic of A MALDI Chamber Solid solution Matrix/analyte/cations 优点： 1）使一些难于电离的样品电离，且无明显的碎裂，从而得到完整的被分析化合物分子的电离产物； 2）特别适用于与飞行时间质谱相配（MALDI-TOFMS）。 6 电喷雾电离（electrospray ionization, ESI） 主要应用于高效液相色谱HPLC与质谱仪的联用。 从雾化器套管的毛细管端喷出的带电液滴，随着溶剂的不断快速蒸发，液滴迅速变小，表面电荷密度不断增大。由于电荷间的排斥作用，就会排出溶剂分子，得到样品的准分子离子。 图1-6 ESI源示意图 通常小分子得到带单电荷的准分子离子，而大分子则得到多种多电荷离子。检测质量可提高几十倍。ESI是很软的电离方法，通常无碎片离子峰，只有整体分子的峰，十分有利于生物大分子的质谱测定。 带电残渣机理：ESI-MS检测到的离子是小液滴中的全部溶剂蒸发后留有带电的残渣； 离子蒸发理论：当小液滴的半径小于10 nm时，溶液中溶解的离子可以从小液滴中直接发射出来。 ESI电离技术解决了两大问题 问题之一：分析生物大分子化合物 ESI质谱可以产生大分子化合物的多电