广西沿海裸体方格星虫群体遗传多样性及遗传分化.PDFVIP

第30卷第12期 水产 科 学 V01．30NO．12 2011年12月 FISHERIESSCIENCE Dec．2011 广西沿海裸体方格星虫群体遗传多样性及遗传分化 宋忠魁1，刘 婷2，杨家林1，蔡小辉1，刘丽梅1，吴蓉2，赵 鹏1 (1．广西海洋研究所广西海洋生物技术重点实验室，广西北海536000；2．衡阳师范学院 生命科学系，湖南衡阳421008) 摘 要：采用随机扩增多态DNA技术检测广西沿海裸体方格星虫4个地理群体的遗传多样性和遗传 结构，10条lobp寡核苷酸随机引物扩增114个个体．分析其中的87个位点。试验结果表明，广西沿 海裸体方格星虫群体间遗传多样性高低及遗传分化与天然屏障导致的地理隔离相关，裸体方格星虫的 浮游幼体并不能有力地促进群体问基因交流。UPGMA聚类分析指出，广西裸体方格星虫群体至少应 作为2个保育单元经营，即江平保育单元和犀牛角一西乡塘一闸口保育单元。 关键词：裸体方格星虫，随机扩增多态DNA，遗传多样性，遗传分化 中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：1003-1111(2011)12—0749—05 裸体方格星虫(Sipunculusnudu5)，又称光裸闸口镇(ZK)，钦州市钦南区犀牛角镇(XNJ)和防城 方格星虫、光裸星虫，广泛分布于大西洋、太平洋、 港市东兴(县)市江平镇(JP)等附近海区。样本活 印度洋沿岸，为世界性暖水种口]。裸体方格星虫在 体运回实验室，取体壁肌肉少量置于95％酒精固定 我国沿海均有分布，广西沿海资源量最为丰富乜]。 液中，4℃储存备用。 裸体方格星虫研究主要集中在形态解剖、繁 1．2方法 殖、胚胎发育、幼体生态、生理生化、环境毒理等不 1．2．1基因组DNA提取 同领域[2]，开展种质资源评估研究并不多见。只有 取约100 mg体壁肌肉剪碎，加入STE缓冲液 随机扩增多态DNA技术应用到裸体方格星虫北 (10 8．0) mmol／LTris-C1，100 mmol／LEDTA，pH 海、三亚、厦门的3个地理群体遗传多样性分析[3]， 600 mg／m1)10 p1，10％SDS50肛l和蛋白酶K(10 以及测序技术用于检测3个地理群体遗传结构的 “l混匀，55℃消化3～4h；酚：氯仿：异戊醇 报道[4-5]。 (25：24：1)等体积抽提2次，氯仿等体积抽提1 中国沿海裸体方格星虫野生资源量下降趋势 次；加入2倍体积无水乙醇，一20℃沉淀过夜，70％ 非常明显，乱捕滥挖和生境的日益恶化是其中最重 乙醇洗涤，室温干燥，灭菌超纯水溶解DNA，临时 要的因素。在广西沿海，除上述因素以外，异地引 置于4℃备用。采用核酸蛋白测定仪(Eppendorf) 进天然苗种养殖和人工苗种放养对本地原种资源 测定总DNA浓度，并以1．0％琼脂糖凝胶电泳