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中国畜牧兽 医 2015,42(2):498—502
ChinaAnimalHusbandry VeterinaryMedicine
doi:10.16431/j.cnki.1671—7236.2015.02.041
蒙古马肠道细菌总DNA提取方法的比较
伊如格勒图,杨丽华,赵一萍,任秀娟,白东义,赵启南,芒 来
(内蒙古农业大学动物科学学院,呼和浩特 010018)
摘 要 :本试验采集蒙古马新鲜粪便样 品,采用酚~氯仿抽提法和 2种细菌基 因组 DNA提取试剂盒法进行样品
中细菌基 因组 DNA的提取 。通过 DNA浓度和纯度 的测定 ,并将其作为模板扩增细菌 16SrDNAV3区特异性片
段对提取效果进行 比较 ,从而找 出更适合蒙古马粪便 中细菌基 因组 DNA 的提取方法 。结果显示 ,3种提取方法得
到的基因组DNA均能用于PCR扩增的模板,其中B试剂盒法提取的DNA数量较多,且纯度高,更适合用于提取
蒙古马肠道微生物细菌基因组DNA及后续的蒙古马肠道微生物多样性等分子生物学试验。
关键词 :蒙古马 ;肠道细菌 ;总DNA提取 ;方法 比较
中图分类号 :Q523 文献标志码 :A 文章编号 :1671-7236(2015)02—0498—05
ComparingtheM ethodsofTotalDNA Extractionfrom IntestinalBacteriainM ongolian Horse
Yirugeletu,YANGLi—hua,ZHAOYi—ping,RENXiu-juan,BAIDong-yi,ZHAOQi—nan,MANGLai
(CollegeofAnimalScience,InnerMongoliaAgriculturalUniversity,Hohhot010018,China)
Abstract:Inthisstudy,weextractedtotalDNA from freshfecalcollectedfrom Mongolianhorses
through phenol—chloroform techniqueand tWObacterialgenomicDNA extraction Kits.To find
moresuitablemethods,wehadcomparedtheconcentrationandpurityofDNA and thelandscape
ofamplifyingthe16SrDNA V3region.Theresultsshowedthatallthreemethodscanbeusedfor
DNA extractionfrom gutbacterialinMongolianhorse.M eanwhile,thequalityandpurityofDNA
extractedbyB Kitwasthemosteffectivewhichcouldhemoresuitablefortheextractionofge—
nomicDNA from gutbacterialandthesubsequentanalysisofthediversityofbacterialpopulation
andbiologyexperimentsinM ongolianhorse.
Keywords:M ongolianhorse;intestina1bacteria;totalDNA extraction;comparisonofmethods
蒙古马是 中国乃至世界最著名 的地方 品种之 DNA。目前尽管粪样 中提取细菌总 DNA 方法很
一
, 属乘挽兼用型品种。能适应恶劣的环境及粗放 多,但是没有哪一种方法是被定为科学界的标准 ,每
的饲养条件 ,具有适应性强 、耐粗饲等特征_l1]。马是 一 种方法都有它的优缺点 ]。实验室常采用的细菌
单 胃草食动物,与反刍动物不 同的是马属动物属于 DNA提取方法有碱裂解法、CTAB法 、SDS裂解
后肠发酵,它 的肠道十分发达
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