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ISSR—PCR技术在对虾中的应用初步研究
维普资讯
第 23卷 第 1期 海 洋 水 产 研 究 V0I-23．NO．1
2002年 3月 M ARTNE FISHERIES RESEARCH M ar．．2002
文章编号 2002)Ol000104
ISSR—PCR技术在对虾中的应用初步研究
王伟难 孔 杰
(巾圉水产科学研究院黄海求产研究所种质资源与媸传育种研究室，青岛 26607i)
摘要 采用ISSR(InterSimpleSeqoeDCeRepeats)技术对中国对虾 (Penaeusch~nensis)进行7PCR
扩增。优化 7PCR反应体系和反应参数．对PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶 电泳和银染检测 从 100
条ISSR 引物中筛选 了40条有清晰产物的引物 ，每条引物检测到的位点数从 1到 l9不等．平均每条
i：物可检测到位点数为7．7个。实验发现 ：中国对虾简单重复序列区主要由两碱基循环组成。通过分
析 ISSR～PCR技术本身的原理 ，探讨 了该技术相对于同工酶检测和RAPD技术在遗传 多样性分析中
的优势所在，以及该技术用于遗传标识的确认和遗传图谱构建方面的前景。
关键词 ISSR—PCR 中国对虾 (Fe~tneropenaeaschinensis) 遗传 多样性
中图分类号：Q78；Q959．223一63 文献识别码：A
Preliminarystudyontheapplication ofinter—simplesequencerepeats
(ISSR)一PCR techniqueinChineseshrimp (Fenneropenaeuschinensis)
wANGWei—ji K0NGJie
(Yellow SeaFisheriesResearchInstitu[e．Qingda。266071)
ABSTRACT Inter—SimpleSequenceRepeats (ISSR)wasthefirsttimetobeappliedtode—
tectthegeneticvariation inFenneropenaeuschinensis．Thereactionsystem forISSR wasopti—
mized；denatured polyacrylamidegeleIectr0ph0resis (PAGE)and silver staining wereem—
ployedinisolatingtheamplifiedfragments．40ISSR primersscreenedfrom 1O0primerscould
generateclearbands．Eachprimeryieldedfrom lto 19bandswiththeaverageof7．7bands，
Theresultsdemonstratedthatthe simplesequencetandem repeats (SFRs)weremainlycorn
posedofdinucleotederepeats．BasedOnitsuniqHecharacters，ISSR techniquecandetectmore
geneticlocithan isozymeandhashigherstabilitythanRAPD which aretWOmain techniques
appliedtOassessthegeneticdiversityatpresent．ISSR haspotentialnotonlyontheanalyzing
thegeneticmarkersbutalsoonthegeneticmapsconstruction ofYenneropenaeuschinen
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