京尼平苷及其体内代谢产物京尼平对HepG2细胞-中国药理学通报.PDF

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１６Ｄｅｃ；３２（１２）：１７５５～６１ ·１７５５· 网络出版时间：２０１６－１２－５１５：１４　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ１５１４．０４６．ｈｔｍｌ 京尼平苷及其体内代谢产物 京尼平对 ＨｅｐＧ２细胞毒性的比较及机制研究 任艳青，田宇柔，李　琛，何颖娜，麻景梅，牛丽颖，王鑫国 （河北中医学院中药药理学实验室，河北省中药配方颗粒工程技术研究中心， 河北省高校中药配方颗粒应用技术研发中心，河北石家庄　０５００９１） ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１６．１２．０２３ 　　栀子为茜草科植物栀子（Ｇａｒｄｅｎｉａｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１６）１２－１７５５－０７ Ｅｌｌｉｓ）的干燥成熟果实，为保肝利胆的常用中药。京 中国图书分类号：Ｒ２８４．１；Ｒ３２２．４７；Ｒ３２９．２４；Ｒ３２９２５；Ｒ９９１ 尼平苷（ｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅ，ＧＳ）即栀子苷，是其含量最高的 摘要：目的　通过比较京尼平苷（ｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅ，ＧＳ）及其体内代 环烯醚萜苷类物质，临床常用于急慢性肝损伤、酒精 谢产物京尼平（ｇｅｎｉｐｉｎ，ＧＰ）的ＨｅｐＧ２肝细胞毒性，进一步明 性肝病、胆汁淤积性肝损伤、慢性肝炎、肝纤维化、非 确中药栀子致肝毒性的物质基础，并探讨其毒性作用机制。 酒精性脂肪肝、肝功能衰竭、肝癌等肝脏疾病的治 方法　采用ＭＴＴ法检测不同浓度ＧＳ与ＧＰ的细胞毒作用； 疗［１－２］，现代药理研究发现京尼平苷还具有抗炎、抗 试剂盒法测定细胞中锰 －超氧化物歧化酶（ＭｎＳＯＤ）、过氧 化氢酶（ＣＡＴ）活力及谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量；二乙酸２′，７′二 氧化、抗癌、抗抑郁、神经保护、抗血管生成［３－５］等广 氯荧光素（ＤＣＦＨＤＡ）染色法测定胞内活性氧（ＲＯＳ）的变 泛的药理活性。近些年来，不少学者研究发现，实验 化；高内涵细胞分析技术（ｈｉｇｈｃｏｎｔｅｎｔｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，ＨＣＳ）进行 动物长期大剂量灌服栀子具有明显的肝毒性［６－１０］， 多参数细胞毒性（细胞数量、核尺寸及形态、核ＤＮＡ含量、细 其肝毒性问题一直是阻碍临床用药的主要问题。目 胞膜通透性、线粒体膜电位和细胞色素Ｃ）分析。结果　ＧＳ 前，栀子引起肝毒性物质基础及毒效机制尚不明确， －１ （２０～１０００ ｍｏｌ·Ｌ ）对 ＨｅｐＧ２细胞无明显细胞毒作用 μ 有学者提出京尼平（ｇｅｎｉｐｉｎ，ＧＰ）苷是栀子肝毒性的 －１ （Ｐ＞００５），５０ ｍｏｌ·Ｌ ＧＰ可明显抑制 ＨｅｐＧ２细胞增殖 μ 主要物质基础，也有学者推测栀子所导致的肝毒性 －１ （Ｐ＜００５），ＩＣ值为（４５０００±２６１５）ｍｏｌ·Ｌ ；ＧＳ对胞 ５０ μ 是由其体内代谢产物京尼平所引起，但尚缺乏直接 内ＭｎＳＯＤ、ＣＡＴ、ＧＳＨ、ＲＯＳ含量无明显影响（Ｐ＞００５），ＧＰ 的实验支持。本研究将不同浓度的京尼平苷与京尼 孵育细胞后，引起胞内ＭｎＳＯＤ、ＣＡＴ活性明显下降，ＧＳＨ含 平作用于人肝癌ＨｅｐＧ２细胞，通过比较二者的肝细 量明显降低，并可明显增加 ＲＯＳ的生成（Ｐ＜００５或 Ｐ＜ －１ 胞毒性，进一步明确栀子肝毒性的物质基