核磁共振技术在代谢组学中的应用2005-04(王亚琴).pptVIP

核磁共振技术在代谢组学中的应用 导师：梁鑫淼 学生：王亚琴 2005.04.28 一 核磁共振的发现及其谱仪的发展 核磁共振的定义 核磁共振技术的发展 核磁共振的主要技术 二 代谢组学 三 核磁共振技术在代谢组学中的应用 一维核磁共振技术的应用 二维及多维核磁共振技术的应用 核磁共振联用技术的应用 四 展望 核磁共振的发现及其谱仪的发展 核磁共振的发现 何谓核磁共振 核磁共振是指处在某个磁场中的物质的原子核系统受到相应频率的电磁辐射作用时，在它们的磁能级之间发生的共振跃迁现象。 核磁共振技术的发展 核磁共振的主要技术 目前，核磁共振的主要技术： （1）一维单核核磁共振技术 （2）二维及多维核磁共振技术 （3）多核核磁共振技术 （4）固体高分辨核磁共振技术 （5）核磁共振联用技术 代 谢 组 学 代谢组学 代谢组学是通过考察生物体系受刺激或扰动后（如将某个特定基因变异或环境变化后），其代谢产物的变化或代谢产物随时间的变化，来研究生物体系的代谢途径的一种技术1。 研究对象 研究方法 核 磁 共 振 在 代 谢 组 学 中 的 应 用 一维核磁共振技术在代谢组学中的应用 （1） 核磁共振氢谱在代谢组学中的应用 1H NMR光谱是一种非靶点的方法。 氢的NMR技术有固有的灵敏性。 随着核磁共振成像技术的发展，利用核磁共振光谱对于人在体研究，可采用非入侵形式。 核磁共振氢谱广泛的应用于代谢组学中。 H.C.Bertram et al.用1H NMR光谱法测定牛血浆中挥发性脂肪酸2。 （2） 13C NMR 在代谢组学中的应用 13C NMR的灵敏度很低。碳谱的灵敏度只有氢谱的1/58008 。 但是，碳谱化学位移广，分辨率较氢谱高；而且，可得到分子骨架信息；可得到羰基，氰基，季碳等氢谱无法得到的信息。科学家们尝试用各种方法提高碳谱的灵敏度。 Hector C.Keun等应用低温探针13C NMR技术通过研究大鼠尿液中的代谢物考察了肼的毒性3 ??????????2 ? 二维核磁共振在代谢组学中的应用 原理7 二维核磁基本上分为两大类 二维J谱： 二维相关谱： 例：大鼠尿液中代谢物的分析（肼给药48小时后） [Anal Chem.2002,74,4588-4593] 3 核磁共振联用技术 LC-NMR联用主要有三种模式： 连续流动模式 停止流动模式 峰存储模式 两种接口：停止流动接口单元 ，峰存储接口单元 。 M.V.S.Elipe et al.用LC-NMR法研究了MK-0869的代谢物4. LC-MS-NMR 的应用S.Bajad et al.用LC-MS-NMR法鉴定了尿中胡椒碱的一种新代谢物5。 展 望 NMR技术在分析测试领域的作用越来越大。 适用于固体，液体，甚至半固体样品。 出现了多种核磁探头，如多共振探头，成像探头，超低温探头，CP－MAS探头等。 800MHz的超高场核磁共振仪应用范围更宽，功能更强大。 核磁的软件技术更先进。 各种化学计量学方法广泛应用于核磁数据处理中，如偏最小二乘法，主成分分析等。 LC-NMR,LC-MS-NMR联用技术越来越成熟。 缺点：灵敏度比质谱要低的多； 氘代试剂一般较贵。 可以采用SPE与NMR在线或离线联用6 代谢组学的研究对于基因组学，基因转录组学，及疾病诊断等方面都有深远意义，核磁技术可提供强大的结构信息，在代谢组学中有广阔的应用前景 参考文献 1 Nicholson J K,Bollard M E,Lindon J C,Holmes E.Drug discovery ,2002,1:153 2 H.C.Bertrama,* , N.B.Kristensenb,A.Malmendalc et al. Analytica Chimica Acta 536(2005) 1-6 3 Hector C.Keun,*+ Olaf Beckonert,+ Julian L.Griffin+ et al. Anal Chem.2002,74,4588-4593 4 Maria Victoria Silva Elipe*, Su-Er W.Huskey ,Bing