几种硬骨鱼纲、鸟纲动物血红蛋白与人血红蛋白氯仿沉淀试验的比较研究.pdf

第 38卷 l期 安 徽 师 范 大 学 学 报 (自然科学版 ) Vo1．38No．1 20i5年 1月 JournalofAnhuiNormalUniversity(NaturalScience) Jan ．2015 DOI：10．14182 ．cnki．1001—2443．2015．01．012 几种硬骨鱼纲、鸟纲动物血红蛋 白与人血红蛋 白氯仿沉淀试验的比较研究 李 琴 ，一， 杨文杰2， 周俊红 ～， 秦文斌 ， 雎天林 (1．中国环境科学研究院环境标准研究所，北京 100012；2．包头医学院 血红蛋 白研究室，内蒙古，包头 014010；3中关村医院 口腔科，北京 100080) 摘 要 ：采用淀粉～琼脂糖混合凝胶电泳的方法分析 了硬骨鱼纲动物 (鲤鱼、鲫鱼、泥鳅)、鸟纲动物 (家鸽、家鸡、家鸭)和人的血红蛋 白在氯仿沉淀试验 中的稳定性 ，发现在泥鳅和家鸭 的血红蛋 白组 分中存在对氯仿不稳定的成分，而在鲤鱼、鲫鱼、家鸽 、家鸡的血红蛋 白中未发现这种不稳定性 ．人 血红蛋白A和血红蛋 白A，对氯仿处理也表现稳定．研究结果提示硬骨鱼纲动物、鸟纲动物及人的 血红蛋白对氯仿沉淀试验有不 同表现 ，可能存在血红蛋白稳定多态性现象． 关键词 ：血红蛋 白；硬骨鱼纲；鸟纲 ；人 ；氯仿 中图分类号：Q513 文献标志码：A 文章编号 ：1001—2443(2015)01—0O54—06 引 言 血红蛋 白(hemoglobin，Hb)作为载氧色素家族成员之一 ，广泛存在于原核生物、真菌、植物和动物等各 类生物体中，并执行着不同的生物学功能，如运输氧气 、催化作用、pH调节作用 、控制体内一氧化氮水平、参 与免疫反应、结合及运输硫化物等-l12J．不 同种属 的生物 中，具有同一功能的蛋 白质在进化过程中可来 自相 同的祖先，作为各物种的载氧体的Hb，也被认为具有相同的进化起源，有着漫长的进化史，例如，有研究显 示 ，脊椎动物的Hb和肌红蛋白在 5．5亿年前 由共同的球蛋白祖先进化而来 3【,4J．在 Hb的进化过程中，自然 选择对 Hb的某些氨基酸的取代起决定性作用 ，当然，不影响 Hb的生物功能的中性突变也有很多．许多蛋 白 质的进化选择集中于对蛋白质稳定性的需求，用来对抗蛋 白质不稳定性的负 向选择对蛋 白质 的进化有重要 的影响L5J．在分子结构上 ，脊椎动物的Hb一般为异源 四聚体，无脊椎动物则存在单聚体、二聚体、多聚体等 多种结构-2J．Hb四聚体的稳定性依赖于亚基间的相互作用 ，包括氢键 、盐键 、疏水作用力等 ，若 Hb分子进化 过程 中的突变使这些作用力发生改变 ，则会提高或削弱其稳定性E6]．由于适应环境的需要和 自然选择的结 果 ，各物种 Hb分子中所积累的突变可对 Hb的稳定性产生不同的影响，使 Hb在稳定性方面存在多态现象， 并可能显示 出某些种属或个体特异性 ，利用这一特异性有可能为物种及其变异体的分析鉴定提供帮助，同 时，对 Hb稳定多态性的研究也可为物种的分子进化研究做出贡献 ． 四氯化碳和氯仿都是制备溶血液的有机溶剂，目的是沉淀除去红细胞基质中的蛋白质，但氯仿容易造成 不稳定 Hb沉淀 ．利用氯仿的这种溶剂特性再结合电泳分析就可 以对 Hb的稳定性进行研究．在脊椎动物 中，硬骨鱼是水域 中高度发展的脊椎动物 ，鸟类则是适应飞翔生活的一支特化的高级脊椎动物 ，而属于哺乳 动物的人类则是地球生物中处于进化最高阶段的动物，其生活环境、行为方式完全不同，面临的自然选择压 力也有所不同，Hb的稳定性方面可能会存在较大差异 ，目前尚未见到该方面的研究报道．本文通过氯仿沉淀 收稿 日期 ：2013—1】一28 基金项 目：国家 自然科学基金21177119)． 作者简介 ：李琴(1977一)，女 ，四川仁寿人 ，副研究员 ，博士． 引用格式：李琴，杨文杰 ，周俊红，等 ．几种硬骨鱼纲、鸟纲动物血红蛋 白与人血红蛋白氯仿沉淀试验的比较研究[J]．安徽师范大学学报 ：自然科 学版 ，20l5，38(1)：54—59． 38卷第 1期 李 琴 ，杨文杰 ，等 ： 几种硬骨鱼纲、鸟纲动物血红蛋 白与人血红蛋 白氯仿沉淀试验 的比较研究 55 试验对几种硬骨鱼纲和鸟纲动物及人 Hb进行