健康育龄期妇女阴道菌群分类研究.pdf

现代检验医学杂志 第 28卷 第4期 2013年 7月 JModLabMed，Vo1．28，No4，July．2013 健康育龄期妇女阴道菌群分类研究 王克迪 ，吕 治，苏建荣 (首都医科大学附属北京友谊医院临床检验诊断中心，北京 100050) 摘 要：目的 探讨应用构建细茵 16SrRNA基因文库的方法，明确健康育龄期妇女阴道茵群构成比例，并建立优势茵参 考范围。方法 2010年 1O月～12月在首都医科大学附属北京友谊医院采集健康育龄期妇女阴道分泌物标本 ，共 30例 ， 一 部分用于涂片革兰染色，另一部分用于提取细菌基因组DNA，构建细菌 16SrRNA基 因文库。同时，应用普通PCR技 术扩增标本 中的阴道加德纳茵、阴道阿托波茵、乳酸杆菌等 7种 阴道常见细茵，确定各菌种检 出率。结果 健康育龄期妇 女阴道分泌物革兰染色可见涂片中以苹兰阳性大杆菌为主 ，仅有极少量革兰染色不定或阴性小杆菌。文库构建结果显示 健康妇女阴道茵群构成芋一，为1～3种细茵，卷曲乳酸杆菌占绝对优势，情，j生乳酸杆菌所占比例较高，以及极少量其他细 茵。卷曲乳酸杆茵95 参考值范围为 5O ～100 ，惰性乳酸杆菌95％参考值范围为4％～44％。普通PCR结果显示 7 种细茵均可检 出，但检 出率 明显不同，乳酸杆茵的检 出率达到 100 ，而其他细菌检 出率低于 3O 。结论 健康育龄期妇 女阴道分泌物茵群表现为以乳酸杆茵 占绝对优势、尤以卷 曲乳酸杆菌为主、同时多种细菌共同存在的一种稳态，该参考范 围的建立对于机体状态及相关疾病评估有重要意义 。 关键词：阴道菌群；16SrRNA文库；PCR 中图分类号：Q503 文献标志码 ：A 文章编号：1671—7414(2013)04～001-04 doi：1O．3969／J．issn．1671-7414．2013．04．OO1 Research oftheVaginalFlora iuHealthyFertileW omen WANGKe—di，LU Zhi，SUJian-rong (ClinicalLaboratoryDiagnosticCenter， Af{tliatedBeijingFriendshipHospital，CapitalMedicalUniversity，Beijing100050，China) Abstract：Objective Themethodofconstruction16SrRNA librarywasusedtoilluminatethebacterialcharacteristicsof healthychild-bearingperiodwomen，andreferencerangeofpredominantbacteriawasfurtherestablished．Methods 30vagi- halsecretionsamplesofhealthychild—bearingwomenwerecollectedfrom OcttODec．2010inBeijingFriendshipHospital。 CapitalMedicalUniversity．OnepartwereforGram stainandanotherpartwerefortheconstructionof16SrRNA library． Besides，7speciesweredetectedwithspecificPCR toknow theirprevalance．Results Healthyfertilewomenhad1to3vagi— nalbacterialspecies(phylotypes)ineachsample，asdetectedbybroad-rangePCR of16SrDNA，andlactobacillusspecies，es— peeiallyLactobacilluscrispatus，werethepredominantbacteria．95 referencerangeofLactobacilluscrispatuswas50 ～ i00 ，andthatofLaetobacillusinerswas4 ～44％．Sevenspeciescouldbedetected，however，thepositiveratesdifferfrom each other，with thatoflactobacillus100 and lowerthan30 ofotherspecies．Coneiosion V