反相液相色谱梯度洗脱法测定PAZ注射液含量及有关物质研究.pdfVIP

反相液相色谱梯度洗脱法测定PAZ 注射液含量及有关物质 陈志华 天津药物研究院 300193 摘 要 研究应用反相液相色谱梯度洗脱法分离检测甲磺酸帕珠沙星注射液含量及相关物质 方法 色谱柱 Diamonsi (TM)钻石C18, 5 m 粒度 柱长200 4 6mm;检测波长331nm;采用乙腈-0 03mol/L 柠檬酸 (pH3.0)为流动相进行线性梯度洗脱 乙腈起始比例为16% 28 分钟内上升至60% 28.5 分钟回到 16% 保持到40 分钟 流速1.0ml/min,柱温30 进样量 15 l 结果 甲磺酸帕珠沙星 四个主要中间体 未知杂质及降解产物在此条件下可实现基线分离 甲磺酸帕珠沙星在0.5 g — 50 g/ml 范围内浓度与峰 面积呈良好线性关系 相关系数R 为0.9999 含量测定平均回收率为99.76% n 9 ,RSD0.75% 结 论 本法可应用于甲磺酸帕珠沙星注射液含量测定及相关物质检查 结果良好 甲磺酸帕珠沙星 PAZ 是新近国外开发成功的氟喹诺酮类药物 因其具有广谱抗 菌作用 起效快 有很好的后抗菌效果 对其它抗菌剂耐药菌也有很好的抗菌作用 光 毒性低 可用于治疗多系统的感染以及不良反应小等特点 使其具有广阔的应用前景 [1][2] [1] 甲磺酸帕珠沙星的含量测定和有关物质检查 有报道采用高效液相色谱法 文献 采 用调整流动相中极性溶液的比例 两次进样分别检测主成份色谱峰前和色谱峰后的相关 物质 本文提供的方法可一次完成主成分与极性相差较大的各相关物质的分离测定 应 用于甲磺酸帕珠沙星注射液的有关物质检查和含量测定 结果良好 1.仪器 试药与试剂 Waters高效液相色谱仪 包括600四元泵 717自动进样器 996光电二极管阵列 检测器和Millennium工作站 甲磺酸帕珠沙星对照品 甲磺酸帕珠沙星注射液均为本院提供, 柠檬酸 三乙胺 分 析 乙腈 色谱纯 重蒸水 .色谱条件与系统适用性试验 用十八烷苯硅烷键合硅胶为填充剂 流动相A 为0.03mol/L 柠檬酸 三乙胺调pH3.0 乙腈 84 :16 流动相B 为0.03mol/L 柠檬酸 三乙胺调pH3.0 乙腈 40 :60 线 性梯度洗脱 0 28.0 分流动相A 从100%变至0 28.0 分 28.5 分A 从0 变至 100% 28.5 分 40.0 分为100%A 检测波长331nm 理论塔板数按甲磺酸帕珠沙星计应不低于 2000 主成分甲磺酸帕珠沙星的保留时间约为 7 分 甲磺酸帕珠沙星与相邻杂质峰的分 离应符合要求 1 .溶液制备 3.1 含量测定溶液 取本品适量 加流动相A 稀释制成每 m l 中约含40 g 的溶液作为供试品溶液 另 取甲磺酸帕珠沙星对照品适量 精密称定 加流动相 A 溶解并配制成每 ml 中约含40 g 的溶液作为对照品溶液 3.2 有关物质检查溶液 取本品适量 加流动相A 稀释制成每 ml 中约含1.0mg 的溶液作为供试品溶液 精 密量取供试品溶液适量 用流动相A 稀释配制成每 ml 中约含10 g 的溶液作为对照品 溶液 4 .溶液浓度与峰面积线性关系及最小检测浓度 取甲磺酸帕珠沙星对照品适量 加流动相配制成每1ml 约含100mg 的溶液作为贮备液 精密量取贮备液 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0ml 分别置10ml量瓶中 加流动相稀释至刻度 摇匀 将最小浓度溶液继续倍比稀释至每 1ml 含 0.5 g 分别进样 20 l 以峰面积A 和浓度C