实时荧光定量聚合酶链反应快速检测产毒铜绿微囊藻 Development of a Real-Time PCR Assay for Rapid Detection and Quantification of Microcystis Aeruginosa.pdfVIP

No．4 第29卷第4期 中国环境监测 V01．29 EnvilonmentalinChina Aug．2013 2013年8月 Monitoring 实时荧光定量聚合酶链反应快速检测产毒铜绿微囊藻 徐恒省，李继影，刘孟宇，景 明 苏州市环境监测中心站，江苏苏州215004 运用实时荧光定量聚合酶链反应(qPcR)方法，对铜绿微囊藻进行了定性定量检测。结果表明，仅含钢绿微囊藻脱氧核 糖核酸(DNA)模板的样品有扩增，对照组小球藻(c^如阳姚)没有检测到扩增信号；扩增产物熔解曲线平稳，峰失且窄，熔 有高度线性相关性，重复性好，符合制备实时定量聚合酶链反应标准曲线的要求。利用该方法建立的标准曲线对实验室 培养获得的铜绿微囊藻DNA样品进行定量检测，与显微镜计数结果基本一致。 关键词：铜绿微囊藻；实时荧光定量聚合酶链反应；微囊藻毒素合成酶基因；定量检测 文献标志码：A 文章编号：l002-6002(2013)04-0089-05 中国分类号：x830．2；X503 ofaRem-TimePCR for Detec60nand Development AssayRapm Quan6右∞60nof朋钯rD咿I括A甜咖D船 XU Meng·yu，JINGMing Heng-sheng，LIJi-ying，LIU Central SuzhouEnvimnmental 215004，China MonitoringStation，Suzhou Real-time ehain was andevaluatedfor detectionand of Abstract：A polymer酗ereaction(PCR)酗saydesigned Mpid quantification thetoxic of fmmtlIe of whichthe alg舱J】If如rDc疵口er曙讯∞口．Apairspec访cprime瑙wasdesigned sequencemcyAregion，of PCR wa8examined withC^幻，℃Zk PCR weredeteetedf如m whichcontained pecificity compared 8p．． amplification8 only 8amples narrow． J|If． cellsand werenotdetectedfbm cunre and was oe九‘gi，lDsn signals C^三D旭Z如sp．．Meltingw∞8t8tion8rypeak specific onrecombinant fortlIe standardcu“ewe 8tandard，the Meltingtempe豫turew踮(83±1)℃．B∞ed pl酗midpMD·18T·mcyA got has andcon_elation w鹅inaccord帅cewith the highlinearity c∞伍cient．Mo他over，thi