13第7章酶工程制药.ppt

⒋根据外界环境对酶的稳定性 的影响来选择 ⒌根据操作要求及反应器费用 来选择 第五节 酶工程在医药工业中的应用 酶促反应的专一性强,反应条件温和。酶工程优点： 工艺简单、效率高、生产成本低、 环境污染小、产品收率高、纯度好。 固定化细胞法生产6-氨基青霉烷酸 1.技术路线 E.Coli 斜面 细胞 固定化细胞 青霉素G 转化液 滤液 6-APA 粗品 培养 固定 转化 过滤 抽提 青霉素酰化酶转化流程图 第六节 酶工程研究的进展 一酶的化学修饰 ⒈酶的化学修饰的目的和意义 ⒉常用的化学修饰剂 ⑴对化学修饰剂的要求 ⑵常用的化学修饰剂 ⒊化学修饰的措施 ⒊化学修饰的措施 ⑴修饰酶的功能基团 ⑵酶分子内或分子间进行交联 ⑶修饰酶的辅因子 ⑷酶与高分子化和物相结合 ⒋修饰酶的特性 ⑴热稳定性提高 ⑵抗各类失活因子能力提高 ⑶抗原性消除 ⑷体内半衰期延长 ⑸最适改变 ⑹酶学性质变化 ⑺对组织分布能力改变 ⒌酶的化学修饰的前景 化学修饰可以改变天然酶各种活 性,扩大酶的应用范围。化学修饰 法是改造酶分子的有效方法，而 且已有了一定的规律性和普遍性， 具有广泛的应用前景。 α-环糊精的分子结构 分子印迹示意图 第七章 酶工程制药 第一节 概 述 一、酶的特性 酶是由活细胞产生的具有特殊催化 功能的一类蛋白质。其特点： ①催化效率高 ②专一性强 ③反应条件温和 ④催化活性受到调节和控制 二、酶工程简介 酶工程是酶学和工程学相互渗 透结合发展而形成一门新的技 术学科。它是从应用的目的出 发研究酶、应用酶的特异性催 化功能，并通过工程化将相应 原料转化成有用物质的技术。 第二节 酶的来源和生产 一、酶的来源 二、酶的生产菌 ⒈对菌种的要求 ⒉生产菌的来源 ⒊目前常用的产酶微生物 第三节 酶和细胞固定化 一、固定化酶的制备 ⒈固定化酶的定义： 固定化酶是指限制或固定于特定空 间位置的酶，具体来说，是指经物 理或化学方法处理，使酶变成不易 随水流失即运动受到限制，而又能 发挥催化作用的酶制剂。 ⒉固定化酶的特点 具有生物催化剂的功能，又有固相 催化剂的功能。 ①可多次使用 ②反应后，酶底物产物易分开，产物 中无残留酶，易纯化，产品质量高。 ③反应条件易控制。 ④酶的利用效率高。 ⑤比水溶性酶更适合于多酶 反应。 ⒊酶和细胞固定化方法 酶和细胞固定化方法 载体结合法 交联法 包埋法 网格型 微囊型 物理吸附法 离子结合法 共价结合法 热处理（细胞） 酶和细胞固定化模式 ⑴载体结合法 ①物理吸附法 ②离子结合法 ③共价结合法 ⑵交联法 ⑶包埋法 ①网格型 ②微囊型 ⑷选择性热变性法 ⒋酶和细胞的固定化载体 ⑴吸附载体 ⑵包埋载体 ⑶共价结合载体 ⒌固定化酶制备技术 ⑴吸附法制备固定化酶技术 ⑵包埋法制备固定化酶技术 ①界面沉降法 ②界面聚合法 ⑶交联法制备固定化酶技术 ⑷共价结合法制备固定化酶技术 二、固定化细胞的制备 ⒈固定化细胞的定义 将细胞限制或定位于特定空间位 置的方法称为细胞固定化技术。 被限制或定位于特定空间位置的 细胞称为固定化细胞。 ⒉固定化细胞的特点 有细胞特性，生物催化剂功能， 固相催化剂特点。 优点： ①无须进行酶的分离纯化 ②保持酶的原始状态，酶回收 率高 ③比固定化酶稳定性高 ④细胞内酶附助因子可再生 ⑤细胞本身含多酶体系 ⑥抗污染能力强 ⒊固定化细胞的制备技术 ⑴载体结合法 是将细胞悬液直接与水不溶性的 载体 相结合的固定化方法。 ⑵包埋法 将细胞定位于凝胶网格内的技术。 ⑶交联法 用多功能试剂对细胞进行交联的固 定化方法。 ⑷无载体法 靠细胞自身的絮凝作用制备固定 化细胞的技术。 三、固定化方法与载体的选择依据 ⒈固定化方法的选择 ⑴固定化酶应用的安全性 ⑵固定化酶在操作中的稳定性 ⑶固定化的成本 ⒉载体的选择 四、固定化酶的形状与