2018版高三生物二轮复习 2.15.1 基因工程（含PCR技术）和细胞工程课件.pptVIP

8.目的基因和受体细胞均可来自动植物或微生物。 9.目的基因插入质粒后,不会影响质粒的复制。 10.转基因抗虫作物与非转基因作物混合播种,会降低害虫种群中的抗性基因频率的增长速率。 11.选择PCR中引物的注意事项: (1)依据目的基因两端的部分核苷酸序列设计。 (2)两种引物之间以及每种引物内部不能发生碱基互补配对。 二、有关细胞工程的提醒 1.制备人工种子需要植物组织培养到丛芽或胚状体阶段。 2.正确认识3类细胞的来源: (1)杂种细胞:植物体细胞杂交。 (2)重组细胞:核移植。 (3)杂交细胞:动物细胞融合。 3.原代培养与传代培养的区别:是否进行了分瓶培养。 4.核移植技术获得的动物与供核动物的性状并不完全相同。 5.动植物的体细胞进行离体培养都需要在无菌条件下进行。 6.植物组织培养中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压。 7.动物细胞培养的2点提醒: (1)只能获得大量细胞,不能得到生物个体。 (2)培养液通常要添加血清,以补充合成培养基中不足的成分。 8.制备单克隆抗体的2点提醒: (1)需要先注射特定抗原免疫处理正常小鼠。 (2)杂交瘤细胞兼有两个亲本细胞的特性:能不断增殖并能产生特异性抗体。 题型一　基因工程 【典例1】(2016·江苏高考·T33)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题: 世纪金榜导学(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用___________________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过__________________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于___________________________态的大肠杆菌。 (2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加___________________________,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中_______________________________________。 (3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为__________________,对于该部位,这两种酶___________________(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。 (4)若用Sau3AⅠ酶切图1质粒最多可能获得______ ____________种大小不同的DNA片段。 【解题技法】→分析推理法 1.关键信息:限制酶、识别序列、重组质粒、PCR、引物。 2.思考路线图: 答案:(1)BclⅠ和HindⅢ　(DNA)连接　感受 (2)四环素　引物甲和引物丙 都不能　(4)7 【借题发挥】——高考大题长句表达专项练 利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是__________________。 答案:吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因成功转化 题型二　动物细胞工程 【典例2】(2016·全国卷Ⅱ·T40)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。 世纪金榜导学回答下列问题: (1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为__________________。过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用__________________的方法。②代表的过程是_______________。 专题15　现代生物科技专题 第1讲　基因工程(含PCR技术)和细胞工程　 答案速填:①DNA连接酶　　　②目的基因的获取　　　③检测与鉴定　　　④基因　　　⑤全能性　　　 ⑥作物脱毒 ⑦细胞增殖　　⑧流动性　　　⑨动物细胞融合和动物细胞培养　　　⑩骨髓瘤细胞 【知识·方法】 一、基因工程和蛋白质工程 1.基因工程的3种工具: (1)限制性核酸内切酶:断开磷酸二酯键,产生黏性末端或平末端; (2)DNA连接酶:连接两个DNA片段形成磷酸二酯键; (3)载体:常用的有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 2.基因工程的操作程序: 3.PCR技术: (1)原理:DNA双链复制。 (2)条件:引物、DNA模板、TaqDNA聚合酶、四种脱氧核苷酸。 (3)过程:90℃以上时,双链DNA受热解聚为单链(变性)→50℃左右,引物与单链相应互补序列结合(复性)→72℃左右,在TaqDNA聚合酶作用下进行互补链的合成(延伸)。 (4)结果:每一次循环后,目的基因的量增加一倍,即呈指数形式扩增(约为2n,n为扩增循环次数)。 (5)与体内DNA复制不同: