水通道蛋白5在鼻息肉组织中的表达及意义.docVIP

精品论文 参考文献 水通道蛋白5在鼻息肉组织中的表达及意义 李成文1 张国胜1(通讯作者) 田军2 （1潍坊医学院 山东潍坊 261042；2潍坊市人民医院耳鼻喉科 山东潍坊 261041） 【摘要】目的 探讨水通道蛋白5（aquaporin-5,AQP-5）在鼻息肉组织中的表达，分析其在该病变中的作用机制。方法 选择正常下鼻甲组织24例和鼻息肉组织32例，采用免疫组织化学技术检测AQP-5在下鼻甲和鼻息肉组织中的表达及分布情况。结果 免疫组化染色显示AQP-5在鼻息肉和正常下鼻甲组织中均有不同程度的表达；固有层腺体中AQP-5的阳性细胞表达率，下鼻甲组显著高于鼻息肉组，差异有统计学意义（P＜0.05）；血管及血管内皮中AQP-5的阳性细胞表达率，下鼻甲组显著低于鼻息肉组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 AQP-5在鼻息肉组织中的异常表达与鼻息肉的形成密切相关。 【关键词】 鼻息肉 水通道蛋白 免疫组织化学 【中图分类号】R765 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）32-0024-02 鼻息肉是耳鼻喉科的常见病和多发病，成年人的发病率较高，其发病有着极其复杂的因素[1]。临床上最常见的病理类型是水肿型，约占总数的85％～90％，组织学表现为炎性细胞浸润、血管扩张、间质水肿及腺体增殖亢进，因此对鼻息肉水肿机制的研究具有重要的临床意义。 水通道蛋白（aquaporins, AQPS）是近年新发现的一种膜蛋白，是一族广泛存在于原核和真核生物细胞膜上选择性高效转运水分子的特异孔道，其在体内液体转运和腺体分泌方面具有重要作用。已有报道指出AQP1、AQP2、AQP3及AQP8与鼻息肉组织水肿的发生密切相关。AQP5是否在鼻息肉的形成中起一定作用，国内外文献报道较少。本研究利用免疫组织化学技术检测AQP5在鼻息肉中的表达和分布，以探讨AQP5与鼻息肉形成的关系。 1 材料与方法 1.1临床资料 鼻息肉组：32例，其中男20例，女12例，年龄37～48岁，标本取自2011年4月～2012年4月在昌乐县人民医院耳鼻喉科住院行鼻内镜下鼻息肉切除患者，术前2周未行鼻用糖皮质激素、抗组胺类药物治疗，术后病理证实为鼻息肉组织。 下鼻甲组：24例，其中男16例，女8例，年龄40～56岁，标本来自同一时期慢性肥厚性鼻炎患者行下鼻甲部分切除术的下鼻甲黏膜。 1.2实验方法 1.2.1免疫组化染色材料 美国Santa Cruz公司生产的羊抗人AQP-5，链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶（strept avidinperoxidase，SP）免疫组化试剂盒购自北京中山生物技术公司，抗体均以0.1mol/L的磷酸盐缓冲液（phosphate-buffor silutlon,PBS,PH 7.4）稀释，浓度为1:100。 1.2.2免疫组化染色 所有标本经4％多聚甲醛固定48h后，石蜡包埋，连续切片，制成厚约5mu;m切片，脱蜡、梯度酒精脱水，3％甲醇双氧水漂洗除去内源性过氧化物酶活性，微波修复抗原，37℃滴加一抗，4℃过夜，加入SP, 37℃反应20min, PBS冲洗，二氨基联苯胺（diamionben zidene,DAB）显色，苏木精复染，脱水、二甲苯透明、中性树胶封片，显微镜下观察。用已知人肾曲小管阳性切片为阳性对照，用PBS缓冲液代替一抗同步染色作为阴性对照。 1.3阳性结果判定及统计学分析 阳性细胞表达为棕黄色，每一标本做连续切片，选其中2～3张结构背景清晰，阳性表达好的切片作为统计分析对象，低倍镜下观察每张切片的阳性细胞表达区域，从中随机观察10个高倍镜视野（times;200），手工计数鼻息肉与下鼻甲组织的各层结构的阳性细胞表达数。用SPSS17.0软件对数据进行t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1AQP-5在鼻息肉与下鼻甲黏膜组织中的分布 AQP-5在阴性对照均不着色，在阳性对照片中见人肾曲小管胞浆呈明显棕黄色。下鼻甲组织的上皮细胞层、黏膜下腺体及血管中均有AQP-5的表达，但主要表达于黏膜下腺体，血管及其内皮表达较少。鼻息肉组织的上皮细胞及固有层均有AQP-5表达，但主要表达于固有层毛细血管及其内皮细胞。 2.2AQP-5在鼻息肉与下鼻甲黏膜组织中的表达 AQP-5在鼻息肉和下鼻甲组织中均有不同程度的表达，AQP-5阳性细胞表达率在固有腺体中鼻息肉组织较下鼻甲组织低，