分子缝合针——DNA连接酶基因转移工具.PPTVIP

基因工程的基本工具 准确切割DNA的工具（“分子手术刀”） ——限制性核酸内切酶 DNA片段的连接工具（“分子缝合针”） ——DNA连接酶 基因转移工具（“分子运输车”） ——基因进入受体细胞的载体 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 从哪里可以找到这种切割外来的DNA而对自身不切割的物质？ 这种酶具有什么作用？ 这种酶如何识别和切割DNA分子? 限制性核酸内切酶的切割方式 基因进入受体细胞的载体 　　 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去！能将外源基因送入细胞的工具就是载体。 作为基因进入受体细胞的载体的必要条件 能自我复制 有切割位点 能与目的基因结合 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达； 有遗传标记基因 对受体细胞无害、容易分离 比较容易得到 * * 第一章 基因工程 第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生 第二节 基因工程的原理和技术 细菌和人是差异非常大的两种生物, 通过基因重组后,细菌能够合成人体的胰岛素，这说明了什么？ 人和细菌共用一套遗传密码 人和细菌遗传物质(DNA)的结构和化学组成相同 人体胰岛素的DNA 大肠杆菌的DNA mRNA 人的胰岛素 　　基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具： 知识平台： 1、基因工程诞生的理论基础是------------ -------------------- ------------------- 2、---------- --------- ----------的发现与应用，又为基因工程的创建提供了技术上的保障。 ---------和---------为基因的分离和重组提供了必要的手段，而------- 能够将外源基因运送到受体细胞中，达到基因工程的目的。 DNA是遗传物质的发现 DNA双螺旋结构的确立 遗传信息传递方式的认定 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 质粒载体 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 载体 同一种限制性核酸内切酶 猿猴病毒SV40的DNA R噬菌体的DNA DNA连接酶 重组DNA分子 1972年,美国斯坦福大学的科学家合成第一个人工DNA重组产物 同一种限制性核酸内切酶 大肠杆菌的含四环素 抗性基因的质粒 大肠杆菌的含卡那霉素 抗性基因的质粒 DNA连接酶 重组质粒 1973年,美国斯坦福大学的科学家,第一个基因工程的诞生 大肠杆菌 (抗四环素和卡那霉素) 限制性核酸内切酶的作用及作用特点： 能识别和切割DNA分子一小段特殊核苷酸序列； 从特定部位(特定核苷酸序列)的两个核苷酸之间(磷酸二酯键)切开。 错切--黏性末端 平切--平末端 重播 　　DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制切断的几个DNA具有相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。 基因的针线──DNA连接酶 　　连接酶的作用是：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同和不同点？ 作用?对基因工程诞生的意义? 作为基因工程的载体有哪些?最常用的是什么? 大肠杆菌质粒的分子结构示意图 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因的存在，将来可用含青霉素的培养基鉴别。 *