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专题二-植物细胞工程.pptx
专题 2 细胞工程的基本内容细胞工程的概念 指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学手段,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 细胞生物学和分子生物学应用的原理和方法细胞整体水平或细胞器水平概念研究的水平细胞工程研究的目的按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品植物细胞工程分类动物细胞工程与基因工程的比较:前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术,后者是分子水平上的生物技术。所采用技术 的理论基础 植物组织培养 通常采用的技术手段 植物细胞的全能性植物体细胞杂交植物细胞工程一、细胞的全能性生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。 1、定义: 2、原因: 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因。3、生物体上的细胞未表现全能性的原因:基因选择性表达的结果P34 4、全能性的高低:①受精卵生殖细胞(精、卵)体细胞②体细胞:植物细胞动物细胞③分化程度低的细胞分化程度高的细胞④幼嫩细胞(分裂能力强)衰老的细胞(分裂能力弱)二、植物组织培养胚状体再分化愈伤组织脱分化外植体植物组织培养过程:植物激素:细胞分裂素、生长素外植体离体的植物器官、组织或细胞脱分化分裂旺盛、排列疏松、高度液 泡化的薄壁细胞(避光)分裂愈伤组织再分化(光照)分裂、分化根、芽分裂、分化植物体植物组织培养的概念: 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽的过程。 5、全能性表达的条件(植物组织培养的条件) 内因:离体的细胞、组织或器官(外植体) 外因:(1)适宜的外界环境条件,例如无菌、适宜的温度、湿度、光照等 (2)培养基:一定的营养物质,激素 胡萝卜的组织培养实验1、实验原理、目的、材料2、植物组织培养的培养基:水、无机盐离子有机小分子营养成分:① 氮源:包括维生素和氨基酸② 碳源:2%—5%的蔗糖溶液,调节渗透压③ 琼脂:起支持作用④ 激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素⑤ pH值:5.0-6.03、方法步骤:1、 选取胡萝卜洗净,削皮,切段2、酒精消毒、次氯酸钠杀菌3、切取1立方厘米左右的形成层小块4、接种,封盖扎紧脱分化5、定期观察和记录愈伤组织再分化6、诱导出试管苗,移栽注意事项(1)激素用量的比例影响实验结果:生长素含量 细胞分裂素含量,有利于根的分化;生长素含量 细胞分裂素含量,有利于芽的分化;比值适中时,促进愈伤组织的生长。(2)培养过程中消毒灭菌,无菌操作的目的。答(1)杂菌和培养物争夺营养 (2)杂菌会生成对培养物有害的物质脱分化再分化 若用“①②③ ④” 表示植物组织培养的过程。请回答: (1) ①表示 , 被培养成为④的根本原因是(2) ②表示 ,其细胞特点 是 。 离体的植物组织器官、组织或细胞植物细胞具有全能性愈伤组织具有分生能力的薄壁细胞二、植物细胞的杂交技术1、细胞杂交技术概念 将不同种植物的体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 (不同种生物之间存在着生殖隔离,所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的)2、相关问题(1)要想让两个来自不同植物的体细胞融合在一起,遇到的第一个障碍是什么?(2)有没有一种温和的去细胞壁的方法?(3)为什么两个原生质体能发生融合,这与细胞膜的什么特性有关?(4)如果两个来源不同的原生质体发生融合形成了杂种细胞,下一步该对此细胞做何种处理?(5)如何将杂种细胞培育成杂种植株?植物细胞A植物细胞B过程植物细胞融合植物组织培养方法?去细胞壁原生质体B原生质体A原生质体融合促进融合的方法?正在融合的原生质体再生出细胞壁脱分化再分化杂种细胞融合完成的标志杂种植物植物细胞融合技术植物组织培养技术植物细胞A去壁融合的原生质体AB愈伤组织杂种细胞AB杂种植株原生质体A人工诱导再生出细胞壁再分化脱分化原生质体B去壁植物细胞B原生质体制备(酶解法去细胞壁)原生质体融合(人工诱导) 杂种细胞的筛选和培养(形成愈伤组织)杂种植株的再生与鉴定纤维素酶和果胶酶物理法:离心、振动、电刺激等化学法:聚乙二醇等试剂植物体细胞杂交技术重点理解以下内容①在实际操作过程中,是把许多马铃薯的原生质体和许多番茄的原生质体放在一起,让它们自由融合,再从中筛选出所需的杂种细胞。②细胞融合为无性繁殖,遗传物质的传递不遵循孟德尔的遗传定律,细胞分裂方式为有丝分裂。③杂种植株的特征:具备两种植物的遗传特征。基因组、染色体组都采用直接相加的方法。④优点:克服不同生物远缘杂交不亲和障碍,培育出自然界没有的、具有优良性状的新品种。 缺点:目前还不未能让杂种植物按
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