RXR激动剂通过抑制PKC激活对抗高糖诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖研究.pdf

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(2)：266-271 [文章编号] 1000—4718(2013)02—0266—06 RXR激动剂通过抑制PKC激活对抗高糖诱导的 大鼠血管平滑肌细胞增殖冰 柴大军 ， 许昌声， 宁若冰， 祝 江， 谢 泓， 林金秀 (福建医科大学附属第一医院心血管内科，福建省高血压研究所，福建 福州350005) [摘 要] 目的：探讨视黄醇类x受体 (RXR)激动剂对高糖诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMCs)增殖 的影响及其作用机制。方法：体外组织块干涸法培养RASMCs，以25mmol／L葡萄糖干预，模拟糖尿病患者体内环 境 ，通过WST一1法检测细胞增殖活性，BrdU插入法测定细胞 DNA合成 ，流式细胞术检测细胞周期进程。用免疫印 迹杂交方法检测细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白依赖激酶抑制物p27 的蛋白表达及蛋白激酶C (PKC)的磷酸化水平。结果：(1)在高糖环境 (葡萄糖终浓度为25mmol／L)下，RASMCs的增殖活性、DNA合成速 率及其在细胞周期 S期的分布比例均显著增加；(2)高糖显著增加 RASMCs内CDK2蛋白的表达，但明显降低 p27 的蛋白表达水平；(3)RXR天然配体9一顺式维甲酸(9一c一RA)可显著抑制高糖诱导的RASMCs增殖活性增 强、DNA合成加速及 RASMCs在细胞周期 S期分布比例 的增加幅度，且具有浓度依赖性 ；10一mol／L浓度 的 SR11237(RXR特异性配体)与等浓度的9一cis—RA具有相似的抑制效应；(4)9-c／s—RA和 SR11237均可显著抑制高 糖诱导的CDK2蛋白表达水平的增加幅度 ，同时上调高糖环境下p27 蛋白的表达；(5)PKC抑制剂 (PKCinhibitor peptide，20p~mol／L)显著抑制高糖环境下 RASMCs的增殖活性和 CDK2蛋 白的表达，但明显增加高糖条件下 p27 蛋白的表达；(6)9-c／s—RA和SR11237可抑制高糖诱导的PKC蛋白磷酸化。结论：PKC的活化参与了高糖 诱导下RASMCs的增殖过程。RXR激动剂通过抑制PKC活化对抗高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖。 [关键词] 高糖；视黄醇类x受体；血管平滑肌细胞；细胞增殖；蛋白激酶C [中图分类号] R543 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2013．02．014 RetinoidX receptoragonistsantagonizehigh—glucose-inducedproliferation 0fratvascularsmoothmusclecellsbyinactivationofproteinkinaseC CHAIDa—jun，XUChang—sheng，NINGRuo—bing，ZHUJiang，XIEHong，LINJin—xiu (DepartmentofCardiology，the AffiliatedHospitalofFujianMedicalUniversity，FujianHypertensionInstitute，Fuzhou 350005，China．E—mail：caidajun@medmail．corn．ca) lABSTRACT] AIM：ToexploretheeffectofretinoidXreceptor(RXR)agonistsonhigh—glucose—inducedprolif- erationofrataorticsmoothmusclecells(RASMCs)．METHODS：RASMCswereculturedinDMEMcontainingglucoseat normalconcentration(5．5mmol／L)．Forhighglucosetreatment，glucosesolutionwasaddeduptoafinalconcentrationof 25mmol／L．Theproliferati