SARS冠状病毒S蛋白抗原表位的分析研讨.pdf

740囝2004学术年会 MHC o和MHCI类分子结合区的互补变化在共进化压力下可能 I类分子的结合区相比，鸡的CD8 导致因配体一受体的配对而相应突变(Luhtala，1997)。CD8Ⅱ多型性是否影响CD8／MHCI类分子的 n分子这样广泛的多型性在其他动物中还没有发现，提 相互作用也是人们感兴趣的问题。像鸡CD8 示鸡的cD8Ⅱ和CD8B在不同的选择压力下进化。 鸡的CD8Q分子的多型性比其他动物高得多，而CD813则保守得多。鸡CD8Ⅱ分子CDR区突变 的聚集也显示是选择压力所致。人们猜测这种选择可能是为了适应病原微生物，尤其是反转录病毒， 它可感染T细胞并且能利用CD8 I类等位基因的选择优势以适应EB病毒逃逸。CD8n和CD813问突变频率的差异可能反应了不同水 et 平的约束或压力使T细胞在胸腺选择中功能的保守(Luhtalaa1．，1998)。与这种假设相符合的是CD8 et a1．，1996)。一些动物可能在B2微球蛋白和CD8的多样性中获得了额外的TCR／MHCI抗原识别能 力。与鸡CD8分子相似的多样性也发现在小型猪(miniatureswine)的CIM分子上(Sundtetal，1992)。猪 的结合位点。因此猪CD4分子的多型性可能作为～种选择机制以改变作为某一未知病毒的受体。鸡 CD8 a的多型性是否在拓展TCR的抗原识别能力或在逃避病毒感染中起一定作用尚不清楚。 核细胞中很好地表达。这为以后用基因免疫的方法免疫BALB／c小鼠研制抗CD4和CD8分子的单 打下了基础。 参考文献(略) SARS冠状病毒S蛋白抗原表位的分析研究孝 华荣虹，周艳君，王云峰，华玉卓，童光志+ 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室，哈尔滨150001 摘要：SARS—CoV的纤突蛋白(Spikeprotein)是病毒粒子的一种主要结构蛋白。它在介导病毒 粒子与宿主细胞受体的结合以及诱导中和抗体中起重要作用。在本实验中我们通过生物信息学分析 s2s3s4s5 并预测了6个纤突蛋白B细胞表位(s1 s6)。利用6个预测的表位我们首先构建了一个 之间，构建成GST融合表达质粒。重组质粒转化宿主茵BL21后经IPTG诱导后得到了高效表达。 Western blot分析结果表明重组融合蛋白可与SARS病人康复血清反应。用重组融合蛋白为抗原制 备了一系列单克隆抗体。将6个预测表位分别与GsT融合表达。在这6个融合蛋白中GST．s5可以 和单克隆抗体D3c5反应，GsT．s2可以和单抗D3D1反应。Westernblot分析表明两个单抗所识别 析SARS．CoV纤突蛋白功能以及防治sARs的研究提供基础， 纤突蛋白； 表位； 单克隆抗体 关键词：严重急性呼吸系统综合征(SARS)； 4本文主要内容于2004年7月在BiochemBiophysResCommun319卷第3期发表 4通讯作者：Email：gztone@public．hr．h1．cn 搠学术年会囝741 acute 严重急性呼吸综合征(Severerespiratory 广东省，随后该病在世界范围内多个国家中并导致数百人死亡，严重威胁人类健康。WHO在2003 年4月16日宣布其病原体为一新型冠状病毒，并命名为SARS冠状病毒(SARS-Coy)。 1个开放阅读 SARS—CoV是一种带囊膜的单链正义RNA病毒。基因组全长约为29．7Kb，有1 框，基因组的组织形式类似于基因它的冠状病毒。基因组序列和氨基酸序列与其它动物冠状病毒比 较同源性非常低。尽管SARS发生后在野生动物体内分离出了基因序列高度同源的病毒，但是这样 的病毒在2003年以前从未从人或动物体内发现。基因序列的系统进化分析表明这种新的病毒