RGD胰岛素和ED71对破骨细胞骨吸收活性的影响研究.pdfVIP

量少又见效快的制剂，也又短时间即能缓解疼痛的外用制剂。 综合淤量，中药的特点与不足，其优越性 尤其在见不足可不断改进的前提下，是显 而易见的。 参考文献 }张文康，郑观清 全编.更年期保健 250问。中国中医药出版社，北京，1998: p83-859. 2 叫琳，刘杜娟. 63例精神分裂症后抑郁临床特征及护理，中华临床医药 杂志.12001，2 (4):78一 79 3VanWinkle,E.Thetoxicmind:thebiologyofmentalillnessandviolence, MedicalHypotheses. 2000;54(1):146-156. 4 Janov.A丁heA门atomvofmentalillness.London:SphereBooksLtd,1971. 5 许又新打郁症的精神症状，}，各‘内科杂志.1998, RGD胰岛素和ED-71对破骨细胞骨吸收活性的影响 薛延 谭辉 蔡尤伯 鱼锋 万摘要〕 目的 探讨RGD胰岛素 (224)和ED-71对骨吸收的作用。 方法将RGD胰岛素 (RGD ，蛇毒提取物 (Ech)和 1713雌二醇 (E)分别加入破骨样细胞 (OLC)与象牙骨片 共培养体系中。并将ED-71及1a(OH)_D;加入培养的OLC中。结果 10-mol/LRGD,Ech 及E_均有不同程度使骨吸收陷窝，数目减少，面积缩小和空调减少的作用;而10mol/L1 。(OH)ID、及】0一。ol/LED-71对OLC成熟和增殖有促进作用，而10,及10-mol/LED-71则有 抑制作用。结论 RGD-胰岛素 (224)能抑制OLC骨吸收活性，不同浓度的ED-71对OLC 的作用不同。 关键词。GD一月夷岛素23(34s丙翁、骨化醇CED-71)骨吸收 破骨细胞 COC)是一种具有骨吸收活性的多核细胞，整个骨吸收过程可分为三步，首 先OC枯附于骨，其次，OC发生极化，最后，OC分泌一系列酶并转运H+，分解骨基质。 因此阻断其中任一步，均可破坏OC的骨吸收作用。 根据这一原理，采用基因工程方法 首次合成了RGD-胰岛素，本文旨在了解它对破骨细胞骨吸收的影响，与此同时也观察了 维生素D衍生物2p(3-轻丙氧)骨化醇(ED-71)对体外培养的OC的影响，并与lx(OHD3 进行比较。 材料与方法 .材料 Hanks液、a-VEM培养液 (GIBCO)、胎牛血清(北京军医兽医防治中心)、RGD胰岛素 (由北京大学唐建国教授提供),17日-estradiol.(MERCK公司)、蛇毒(Echistatin,Sigma 公司)，奈酚AS-BI磷酸盐、坚牢盐GBC，象牙骨片 西〔澳大利亚大学郑铭豪副教授惠赠) ED-71及la(OH)D,(由日本中外制药公司提供)。 二.标本来源 骨巨细胞瘤均取目本院骨肿瘤科手术后新鲜标本，并且所有取样都 经过病理科的病理切片诊断，其病理恶性分级程度为工或!I级。 三.OLC的体外培养 取新鲜，按文献门方法，无菌分离的人骨巨细胞瘤组织块，将细胞悬液转入a-MEM培养 液 (含15%胎牛血清、25m14OL/LHEPES,800u/ml庆大霉素)的24孔培养板中，每孔中加 入培养液0.5ml，细胞悬液80u1，于045CO孵箱内37℃培养2小时，当细胞贴壁后，冲洗 换液，去掉未贴壁细胞，继续培养。 在培养系中分别加入 10-7-10mol/LED-71与1a(OH)D:，观察细胞形态学变化，于培 养第3天以及第6天分别对细胞计数和拍照。 四.OLC的骨吸收实验 (1)无菌象牙骨片的制备 低温冰箱储藏的象牙骨片，厚度约为50um,裁剪为面积0.6X0.6c厅大小均一的骨 片.参照文献j2j方法处理骨片以备使用。 (2)OLC骨吸收实验 在24孔培养板内，每孔加入0.5mla-MEK培养液，并加入灭菌骨片一片，置孵育箱中 培养 1小时。然后加入细胞悬液，置37C,5oC0培养箱内培养2小时后，取出骨片，清洗 后转入另一个24孔培养板，培养过夜后分别加入10mol几RGD胰岛素、蛇毒、1了日雌二 醇 (E)。 使用OLYMPUS倒置光相差显微镜，观察骨片上吸收陷窝的变化。培养第2天计数每个 骨片上所贴附的破骨细胞数，同时对使用不同药物所形成的吸收陷窝及吸收空洞进行