白芥子挥发油抗肿瘤作用初步研讨.pdf

聊q、 摘要 摘要 本文阐述了异硫氰酸盐(ITCs)的来源、种类、理化性质、防癌抗癌研究概 况以及ITCs的一些其它作用。进行了白芥子挥发油提取工艺的优化，并对其化 学成份进行鉴定；观察白芥子挥发油对肝癌H22细胞以及小鼠肝癌H22移植性 肿瘤的抑制作用，并初步探究其作用机制，为白芥子挥发油的开发利用提供新的 ‘ 思路。 本文以L9(34)正交设计试验优化白芥子挥发油的提取工艺，并通过GC．MS 气质联用法分析其化学成份；采用台盼蓝染色排染法以及MTT法检测白芥子挥 发油对小鼠肝癌H22细胞的体外抑制作用，采用DNA琼脂糖凝胶电泳法以及流 式细胞仪PI单染法检测白芥子挥发油对H22细胞凋亡与细胞周期的影响；通过 建立小鼠肝癌H22腹水瘤模型和实体瘤模型观察白芥子挥发油对小鼠肝癌H22 的体内抑制作用，并通过HE染色法观察细胞形态的变化，检测胸腺、脾脏指数 探究白芥子挥发油的毒副作用，并采用丫啶橙染色观察肿瘤细胞凋亡的特征，采 用免疫组织化学方法检测白芥子挥发油对小鼠肝癌H22实体瘤凋亡基因Bax、 Bcl．2表达的影响。 结果表明白芥子挥发油最佳提取条件为：水解温度50。C、缓冲液pH值为 5．0、抗坏血酸浓度为0．5mmol／L，挥发油提取率可达O．164％，所提取挥发油主 要成份为异硫氰酸烯丙酯(89．411％)；白芥子挥发油在体外对小鼠肝癌H22细 胞的生长有显著的抑制作用，其抑制作用可能是通过细胞凋亡来实现；白芥子挥 发油对小鼠肝癌H22腹水型小鼠具有一定的生命延长作用，且对小鼠肝癌H22 实体瘤也有着显著的抑制作用，呈现良好的剂量．效应关系，但大剂量给药组毒 副作用明显；白芥子挥发油可能通过上调Bax表达与下调Bcl．2表达，提高 Bax／Bcl一2比率以促进肿瘤细胞凋亡。 关键词 白芥子挥发油；提取工艺；小鼠肝癌H22；抗肿瘤；细胞凋亡 ， } was better of thevolatileoilfrom investigated，whichmightprovidethoughtsusing Semen Albae． Sinapis The extractionconditionwas the optimum investigatedby orthogonaldesign thechemical ofthevolatileoilfromSemen Albae L9(34)，and components Sinapis were inbibitionaleffectofthevolatileoilfromSemen analyzedGC·MS；the by toH22 MTT in Albae cellswasdetected blue and Sinapis byTrypanstaining assay influenceofH22 andcell thevolatileoilwas vitro；the cells’apoptosiscycleby DNA and detected iodide(PI)staining；