表面活性剂TX-100对苏丹红Ⅱ影响研究学位论文..docVIP

表面活性剂TX-100对苏丹红Ⅱ 的浊点萃取分析方法研究 摘要：本文简要介绍了染料苏丹红的一些分离方法，根据苏丹红在紫外可见分光光度计下501nm处有最大吸收波长，实验获得浊点萃取的最佳条件；在最佳实验条件下，计算表面活性剂TX-100对苏丹红Ⅱ的萃取效率，并用新鲜鸭蛋黄做了验证实验，能验证实验所得的结论。 关键词：苏丹红 TX-100 浊点萃取 引言 苏丹红是一种人工合成的偶氮类、脂溶性的化工染色剂, 1896年科学家达迪将其命名为“苏丹红”并沿用至今.主要用在机油、汽车蜡和鞋油等工业产品的生产.随着人们对苏丹红结构及致毒性的逐步了解,国际癌症研究机构(IARC )将苏丹红归为第3类可致癌物质,这类物质虽缺乏足够的直接使人类致癌的证据,但是具有潜在的致癌危险.例如，苏丹红Ⅰ用于小鼠膀胱实验中，引起强烈的致癌作用，苏丹红Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ也怀疑具有致癌性。因此，中国，欧盟及其他许多国家禁止在食品中添加任何浓度的苏丹红。但是，在一些国家苏丹红仍被用于食品当中，这种违法行为对公众的健康产生了影响。因此，建立一种简单，快速，可信的检测方法是必需的。目前苏丹红的检测方法主要有高效液相色谱法、液相色谱-质谱法、气相色谱-质谱法等,但其前处理均用有机溶剂,采用表面活性剂进行前处理的方法还未见有报道。该方法具有经济、安全、高效、简便等优点，已广泛用于生物大分子、临床治疗药物监测、体内微量元素、有机毒物及中药成分等样品地分离分析预处理；同时是一种价格便宜、毒性小、处理过程方便、有较高的选择性、环境友好的绿色分析方法。 材料与方法 2.1仪器 岛津分光光度计：UV1700，（东京，日本）； 岛津高效液相色谱仪：LA-20AT泵、SPD-M20A二极管阵列检测器、Lcsolution色谱工作站，（东京，日本）； 7725（i）手动进样器，ODS C18色谱柱（5um 46mm×250mm），（江苏汉邦试剂有限公司）； HH-s26s数显恒温水浴锅，（江苏通州仪器厂）； 超声波清洗仪，（昆山市超声仪器有限公司）。 离心机 2.2试剂 苏丹红Ⅱ（1－[（2，4－甲基苯）偶氮]－2－萘酚），含量为90％，（Dr.Ehrenstorfer,Augsburg,Germany）。 标准储备液用丙酮稀释定容至100mg·L-1,标准使用液用丙酮－水（50:50，V/V）溶液配制。 TX-100（辛基酚聚氧乙烯醚，分子量为1000）， 丙酮和乙腈（江苏汉邦试剂有限公司）， 碳酸钠，硫酸铵，氯化钠（国药集团化学试剂有限公司）。 以上试剂均为色谱纯或分析纯，所用水均为二次蒸馏水。表面活性剂用二次蒸馏水配制浓度为250g·L-1的溶液。 2.3实验方法 2.3.1浊点萃取过程 取一支10mL的塑料离心管加入1%的TX-100水溶液1.0 mL，加入10μg/mL的苏丹红Ⅱ号（用丙酮配制）1mL ，用蒸馏水定容至10mL，再加入0.7g Na2CO3，摇匀，在70℃水浴中加热30min，在4000转/分的离心机下离心10分钟，此时溶液完全分成透明的两相，上层为表面活性剂富集相，下层为水相用注射器抽去下层稀释相溶液，将剩余溶液用丙酮水溶液（体积比1:1）定容至10mL，摇匀，用岛津UV－1700对其进行吸光值的测试。 2.3.2鸭蛋黄的萃取 取市售的新鲜鸭蛋取鸭蛋黄20克，用搅拌机搅碎，加入一定量的苏丹红Ⅱ储备液，加乙腈50毫升，超声15min，离心10分钟后，取上清液作为苏丹红样品液，再利用浊点萃取来检测鸭蛋黄中的苏丹红Ⅱ。首先将加入苏丹红Ⅱ的样品中加入一定量的TX-100水溶液，用二次蒸馏水定容至10mL，再加入0.7g Na2CO3，摇匀，然后将离心管置入恒温水浴锅中，在70℃条件下加热30min，在4000转/分的离心机下离心10分钟，此时溶液完全分成透明的两相。利用带有长针头的注射器仔细的把下层水相吸出后用0.45μm滤膜过滤，取一定的量稀释后可以直接往高效液相色谱仪进样20μL待测。 3.实验结果与讨论 3.1 TX-100对苏丹红Ⅱ吸收曲线的影响 ① 取10支10mL的玻璃离心管各加入10μg/mL的苏丹红Ⅱ号（用丙酮水溶液（体积比1:1）配制）0mL、1.4 mL、1.6 mL、1.8 mL、2.0 mL、2.5 mL、3.0 mL、3.5 mL、4.0 mL和4.5 mL，用丙酮水溶液（体积比1:1）定容至10mL，摇匀，用岛津UV－1700对其进行吸光值的测试，以第一支离心管为空白参比，对剩余9支离心管中溶液进行测定，数据见图－1。 图一：苏丹红标准曲线 ②取9支10mL的玻璃离心管先各加入2.0mL 250g/l的TX-100水溶液,再各加入40μg/mL的苏丹红Ⅱ号（用丙酮水溶液（体积比1:1）配制）0mL、0.5mL、0.8 mL、1.0m