X—射线衍射法研究DPPG／山莨菪体系的交插脂双层结构.pdfVIP

维普资讯 拜 学屯扛 第 41卷 第 23朝 CH]NESE SCrENCE BU IIETIN @ 2哪一 X．射线衍射法研究 DPPG／山莨菪体系的 交插脂双层结构 7弓 陈建文 豫盲 _c击敬泽 黄 芬 关键词交 紫 pf)P，苠菪彼 笠4， 山蓖菪碱作为中 屎， 毒用机 多… 1 材料与方法 1．L 材料 二棕榈酸磷脂酰甘油 (DPPG)系 Sigma公司产 品，山莨菪碱溴氢酸盐为成都第一制药广产 品，HEPES为瑞士 Fluka产品，试剂均用 2次重蒸水配制 ． 1．2 方法 1．2．1 DPPG脂质体的制备 称 10mgDPPG溶在 1：1的氯仿 ／甲醇中，用氮气吹lT在 玻璃容器中铺成一薄膜，真空干燥过夜．磷脂悬洋在 10mmoI／LHEPESpH72的缓冲液 中 样 品管加 6mmol／L山莨菪碱，于 45℃保温 1h，剧烈振荡 5min，使形成多层大脂质体 ，在室温 再放置至少 2h，用 BackmanTL一100型离心机，50000r／min离心 30min，弃上液 ，脂贡体沉淀 I9950905牧稿 I996，叭一22收修改稿 *国家 自特科学基金资助项 日 维普资讯 第 23朗 2179 直接制样，埽后样品浓度约 300rag／mL I．2．2 x．射线衍射 _x射线衍射实验在 R[GAKUD／iltax—RB型转靶 x光机 上进行 (清华 大学材料学研究所，x一光实验室提供) 采用 cu靶，k 线， =0．154nm，石墨晶体单色器滤 波，工作 电压电流：40kV 120mA，细聚焦线状光源，发散狭缝 DS=l／6，接收狭缝 RS=014 miTt，散射狭缝 SS=l／2。，采用透射方法，分别在 1一7。和 19--23范围内洲量小角度和大角度 x一射线衍射，衍射 图谱和数据直接 由计算机记录 实验温度 2O℃． 2 结果 小角度 x一射线衍射：图 l为 DPPG 和 DPPG／山莨菪碱的小角度 x一射 线衍射 图谱 ．纯 DPPG的片层重复间距为 5．5hilt(图 1(a))，片层出现第二、第三级衍射峰 说明脂质体的片层 有序陆较高 这是典型的双层膜 L 相结构，DPPG／山莨菪碱的小角度衍射除在 5．5hilt处出 现一峰位外，还出现重复闻距为 3，5nm 的峰 (图 l(b)) 说明在 20L：样品浓度约为 300mg／ mL时 大部分DPPG在山莨菪啵的作用下形成了交插双层结构，即 I相．由于样品中除交插 脂砹层外 还有一定量的非交插脂结构，以及 由于仪器分辨率的局限，它们各 自的第二、第三级 峰不能分别显示出来．图谱上出现较宽的假二级衍射峰，可能是逐个小峰的叠加，它的重复周 期数与两峰位都不匹配 大角度 x一射线衍射：纯 DPPG和 DPPG／山莨著碱的大 角x 射线衙射 由凰 2指出，纯的 DPPG~#射峰出现在(J．42nllt处 并在0．41nm附近有一台阶 (图2(8))说明在20℃时，该 【 J 圈 1 小角度 x 射线衍射图谱 图2 大角度x射线衍射图谱 2IIC．(a)DPPG浓度约 300rag／mE．10mmoliIHEPES 20K．(aj，(b)条件习冈 1，宴驻条 件见方挂 缓冲液，pH 72；chJDPPG壤 廑约