玄参中哈巴俄苷的提取工艺优化.docVIP

精品论文 参考文献 玄参中哈巴俄苷的提取工艺优化 　童婧 郭晓蓉 　　（安徽医科大学临床医学院 安徽 合肥 230601） 　　【摘要】 目的：玄参中主要化学成分为环烯醚萜类、苯丙素苷类、芳香糖苷类等;目前主要的质量控制手段有指标性成分的含量测定等, 哈巴俄苷是2015版《中国药典》中规定的玄参含量测定项目，也是其主要药效成分。现优化玄参中哈巴俄苷的提取工艺，为深入研究玄参提供进一步参考。方法：以哈巴俄苷为总环烯醚萜苷的指标性成分，采用正交实验法对提取溶剂种类、浓度、提取时间、超声时间、溶剂用量进行优化。结果：最佳提取工艺条件为：玄参饮片，加入10 倍量80%甲醇，超声提取0.5h，回流提取2h，过滤后，再加入8倍量的甲醇回流提取1.5h。结论：正交实验法可用于玄参活性成分的提取工艺的优化。 　　【关键词】玄参；环烯醚萜；哈巴俄苷；提取；甲醇；超声 　　【中图分类号】R94 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）24-0380-02 　　玄参为玄参科植物玄参(Scrophularia ning-poensis Hemsl)的干燥根，别名元参、黑参、浙玄参、乌元参等，其主要分布于东北、华北与华东地区，冬季茎叶枯萎时采挖，除去根茎、幼芽、须根及泥沙，晒或烘至半干，堆放3～6天，反复数次至干燥。玄参始载于《神农本草经》，列为中品，其味甘、苦、咸，性微寒；归肺、胃、肾经;有凉血滋阴，泻火解毒的作用；按《药类法象》谓：玄参为“足少阴肾经之君药也，治本经须用。”按《本草蒙筌》谓:“治空中氤氲之气，散无根浮游之火，唯此为最也。”《景岳全书》记载“此物味苦而甘，苦能清火，甘能滋阴。以其味甘，故降性亦缓。本草言其唯入肾经，而不知其尤走肺脏，故能退无根浮游之火，散周身痰结热痈，逐颈项咽喉痹毒、瘰疬结核… … ”。 　　玄参中具有多种化学成分，主要为生物碱、糖类、甾醇（Phy- tosterol）、氨基酸（左旋天冬酰胺 L-Asparagine 等）、脂肪酸（主要是油酸、亚麻酸、硬脂酸）、挥发油、胡萝卜素和维生素A等。玄参已经分离出的化学成分有50多种，主要是环烯醚萜、苯丙素苷、有机酸及挥发油等，已经从玄参根中分离得到多种环烯醚萜类化合物，分成4类：九碳骨架的环戊烷型、7，8-环戊烯型和7，8-环氧环戊烷型和变异环烯醚萜。环烯醚萜类成分是使药材加工后内部能变乌黑色的成分。 　　实验表明玄参环烯醚萜苷中哈巴俄苷和哈巴苷能增加小鼠空斑形成细胞计数、血细胞凝集抗体滴度及巨噬细胞移动指数。谢丽华[1]等用甲状腺素灌胃的方法致小鼠阴虚证候，发现哈巴俄苷可促进阴虚小鼠Con-A诱导的脾淋巴细胞增殖和体内淋巴细胞产生IL-2能力；皮下注射哈巴俄苷能使其受抑制的免疫功能恢复，阴虚+哈巴俄苷组小鼠基本无阴虚组消瘦、躁动等阴虚症状，由此推断哈巴俄苷为玄参“滋阴”功效的物质基础之一。此外，哈巴苷，哈巴俄苷对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿甲单抱菌均具有抗菌活性，这些化合物可能是玄参抗菌作用的物质基础。 　　目前，玄参提取工艺的优化主要以环烯醚萜为考察指标进行优化[2，3]，其中哈巴俄苷是2015版《中国药典》中规定的含量测定项目，也是玄参的主成分和药效成分。 　　1.仪器与试药 　　紫外分光光度计Genesysl0，电子分析天平，R-201型旋转蒸发仪，x-4型数字显示显微熔点仪，KQ-500D型数控超声波清洗器，索氏提取器，恒温水浴锅，优普超纯水系统，FW100高速万能粉碎机，DZF-6050型真空干燥箱。 　　甲醇（分析纯），考察提取工艺所用玄参样品来源于浙江，为新鲜玄参块根切片阴干所得。样品鉴定为玄参科植物玄参 Scrophularianingpoensis Hemsl.的根。样品粉碎，过50目筛，备用。 　　2.提取溶剂考察 　　玄参的传统提取方式通常为水煎煮后服用，现在此基础上加以优化，以哈巴俄苷的得膏率和含量为指标，取玄参粉末0.4g若干份，精密称定，分别精密加入纯水10mL，80%、甲醇10mL，80%乙醇10mL，均超声30min，提取两次，合并上清液至25mL 容量瓶中，用80%甲醇定容至刻度。表1结果表明，80%甲醇提取率最高。 　　 　　3.4 最佳提取工艺的确定 　　根据得膏率观察，最佳工艺应为A2B3C3D2，根据哈巴俄苷的提取量计算，最优的提取工艺应该为A2B3C3D1。本着节约成本和方便操作的原则，确定最终的提取工艺为A2B1C3D1，即玄参饮片，加入10倍量甲醇，超声提取0.75h，回流提取2h，过滤后，再加入8倍量的甲醇回流提取1.5h。 　　哈巴俄苷是玄参化学成分中含量最高的成分,是玄参质量控制的主要依据, 因此对该