谷胱甘肽对罗非鱼生长的影响及其机理研讨.pdf

摘 要 论文研究了谷肌甘肤 (glutathione,GSH)对奥尼罗非鱼幼鱼生长的影响，从 在体和离体两方面探讨了GSH影响罗非鱼生长的机理，旨在为水产养殖中应用GSH 作为绿色饲料添加剂，促进鱼类的健康养殖提供理论依据。 在体试验中，以不添加还原型谷耽甘肤的纯化饲料为对照，分别添加100mg kg`.200-g-kg-和‘400mgkg-，谷肤甘肤，研究初始体重约3.30g的奥尼罗非鱼幼 鱼生长、饲料利用、体成分和激素分泌情况。每一饲料组设三个重复水族箱，每箱 随机放养30尾鱼，根据鱼的摄食投饲率在3%-6%0罗非鱼在循环水系统饲养8 周，生长试验结束后，又进行了2周的摄食率的试验。结果表明，200mgkg一饲料 组罗非鱼的特定生长率、饲料效率、蛋白质效率和干物质表观消化率均显著高于对 照组和100mgkg一饲料组(P0.05)，肥满度、肝体指数、全鱼和背肌营养成分各 组间显著不差异(P0.05),200mgkg，组罗非鱼血浆和肝脏类胰岛素生长因子 (IGF-I)含量显著高于其它饲料组，血浆三碘甲腺原氨酸(飞)含量在200mg纯一， 组和400mgkg-，组也显著高于其它饲料组。200mgkg组罗非鱼血浆和肝组织中 的丙二醛显著低于于对照组 (P0.05)，谷胧甘肚过氧化物酶活力显著高于对照组 (P0.05).添加GSH的各试验组罗非鱼的摄食率显著高于对照组 (P0.05)。说明 谷胧甘肚能促进罗非鱼幼鱼生长和提高饲料利用率，促进】GF-I和Ts分泌，提高 机体的抗氧化能力，对罗非鱼具有良好的促摄食作用。 在离体试验中，首先对罗非鱼肝细胞的体外培养的方法进行了研究。对采用胶 原酶直接消化法分离罗非鱼肝细胞进行了研究，并对罗非鱼肝细胞在体外培养的最 适条件进行了初步研究。结果表明:0.05%胶原酶对罗非鱼肝细胞的分离效果优于 0.1%的胶原酶和。.25%的胰蛋白酶。采用两步低速离心法 ((50g,2min;30g,2min) 可很好的去除消化细胞中的杂细胞，得到纯度90%以上的肝细胞。在本试验条件下， 罗非鱼肝细胞的适宜的培养条件为:温度为250C-300C，加入胎牛血清的量为完全 培养液量的10%，接种密度为105-1护个/Mi. 在罗非鱼肝细胞的原代培养基础上，研究了GSH对罗非鱼离体肝细胞生长和 生理功能的影响。分别在有血清和无血清的两种培养液中加入不同剂量的GSH(。、 30.100.300.900mg-L-)，将含有GSH的培养液加入到已培养了4811的罗非鱼的 原代培养的肝细胞中，分别在加入GSH后的2411.4811.7211时测定其增殖情况，同 时取上清液，测定上清液中IGF-I、白蛋白、过氧化氢 帆。，)含量和谷草转氨酶 (GOT).丫一谷氮Ift转肤酶(丫{丁)的活力。试验结果表明:在无血清培养和有血清 培养时，添加适量GSH可显著促进肝细胞的增殖、增加工GF-1的分泌，可显著降低 上清中过氧化氢的含量，使白蛋白的分泌量显著升高，丫GT活力显薯升高，上清 中GOI的活力显著下降。在无血清培养时。添加GSH对肝细胞增殖和肝细胞的生理 功能的影响比有血清培养时更显著 以上结果提示GSH促进罗非鱼生长的作用机制有以下几点:(1)GSH对罗非鱼 具有良好的诱食作用。可提高罗非鱼的摄食率，同时也减少了营养索在水中的溶失; (2)GSH可提高机体对营养素的吸收利用，提高饲料的利用。促进机体的生长:(3) GSH可促进内分泌激素T，和工GF-1的分泌，通过对生长激素轴的影响而调控机体生长; (4)GSH发挥抗氧化功能，防止动物机体受到自由基损伤。(5)GSH维持肝细胞内 的氧化还原的平衡，对肝组织具有保护功能，从而保证了各种生理生化反应的正常 进行。 关键词:谷耽甘肚:奥尼罗非鱼.在体;离体:生长;机理 第一章 谷肌甘肤对罗非鱼生长、摄食及生理生化指标的 影响 1前言 近年来，现代水产养殖业向高密度、集约化方向发展，养殖生态环境恶化，导 致鱼虾病害频繁发生。目前主要使用广谱抗生素来控制病害的发生。这些抗生素过 度使用使病菌产生耐药性，并且抗生素在生物体内的残留、富集，最终将会对人体 构成危害。随着人民生活水平的日益提高，对动物产品的消费要求已由量的追 求转变为质的要求，特别是我国加入世界贸易组织后，动物产品的安全性问题 也随之成为世人关注的热点。目前我国水产养殖业最迫切需要解决的