三苯基甲烷类染料氧化酶基因(tpmD)在大肠杆菌中的无诱导表达 Non-induced expression of the gene for triphenylmethane dye oxidase (tpmD) in E. coli.pdfVIP

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2018-01-12 发布于上海
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三苯基甲烷类染料氧化酶基因(tpmD)在大肠杆菌中的无诱导表达 Non-induced expression of the gene for triphenylmethane dye oxidase (tpmD) in E. coli.pdf

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三苯基甲烷类染料氧化酶基因(tpmD)在大肠杆菌中的无诱导表达 Non-induced expression of the gene for triphenylmethane dye oxidase (tpmD) in E. coli

第29卷第3期环境科学学报 V01．29，No．3 2009年3月 ActaScientiaeCircumstantiae Mar．，2009 WeiJ G S ofthe B，SunP，Renz，et越．2009．Non·inducedexpressiongenefortriphenyhnethanedyeoxidne(tpmD)in CiIcumstantiac，29(3)：527—535 的无诱导表达卫晋波1，2”，孙国萍2一，任随周2，岑英华2，王燕4 1．中国科学院南海海洋研究所，广州510301 2．广东省微生物研究所菌种保藏与应用重点实验室；广东省微生物研究所，广州510070 ■ 3．中国科学院研究生院，北京100049 4．广东省科技图书馆，广州510070 收稿日期：2008—04一10修回日期：2008—06·23录用日期：2008—12-26 擒要：为了解决嗜水气单胞菌DN322对鱼类的潜在致病性问题，有必要克隆表达该菌的三苯基甲烷染料脱色酶基因tpmD．通过PCR方法获得 DH5a和E．coliBL21．结果发现，有启动子的融合基因能被E．coil在不加诱导融合基因片段分别连接到质粒pMDl8．T中，转化大肠杆菌E．eoli 物IPTG的条件下高效正确表达，脱色酶活性甚至超过基因供体菌DN322．将上述两株大肠杆菌工程菌株在自然水体中进行孔雀石绿污染小试究结果证明，基因工程菌在不加营养物的条件下也有很强的脱色活性和长期的存活能力；在tpmD基因3’端加入的用于螯合双砷荧光染料的 18bp编码氨基酸碱基序列不影响此基因的表达和酶的脱色活性，这将赋予此工程菌可示踪性．关键词：嗜水气单胞菌脱色酶基因(tpmD)；三苯基甲烷染料；希瓦氏菌启动子；元诱导表达中圈分类号：X171 文截标识码：A 文章编号：0253-2468(2009)03—527—09 Non-inducedofthe for expressiongenetriphenylmethanedye E．CO历 WEI Yan4 Jinb01-2”，SUN Suizhou2，CENYinghua2，WANG Guopin92一，REN 1．SouthChinaSeaInstituteof of 510301 Oceanography。ChineseAcademySciences，Guangzhou Instituteof Provincial ofMicrobialCultureCollectionand 510070 KeyLaboratmy Application，Guangzbou 2．Guangdong Microbiology．Guangdong 3．Graduate ofChinese 0f 100049 University AcademySciences．Beijing 4．TheScienceand 0f 510070 Province．Guangzbou TechnologyLibraryGuangdong 26December Received10 receivedinrevisedform23June