用患者尿中有形成分制备尿沉渣质控物的探讨.docVIP

精品论文 参考文献 用患者尿中有形成分制备尿沉渣质控物的探讨 周晓慧 杨晓玉 潘春玲（贵州省黔南州妇幼保健所 558000） 【中图分类号】R446.12【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）27-0227-02 尿沉渣检验是临床常规检查必不可少的项目，开展质控工作十分重要。笔者利用肾脏病人尿中有形成分多的特点，把这些有形成分收集起来，经过筛选、醛化处理制备出含有红细胞、白细胞、上皮细胞和管型等成分，制备不同浓度的质控制。经试验观察效果满意，现报告如下。 一、材料与方法 1、材料：(1)质控物来源：有选择性收集肾脏病住院患者尿液，离心1500 r／min，10分钟，弃去上液留取沉渣。(2)试验尿：留取健康人尿液，经化学检查及沉渣检查无异常者，弃去沉渣留取上液。(3)2.5%戌二醛。(4)洗液：用全自动血液分析仪稀释液。(5)FAST- READ10。固定计数板，下称F-R板，能测10份尿样，每一计数池又划分10个大格，90个小格，计数10个大格的细胞和管型数，即求出每ul尿沉渣计数量。(6)Biosed尿沉渣离心管与F-R配套的尿液定量管。 2、方法：(1)收集病人的尿液按常规方法离心，镜检筛选出细胞形态规整、红、白、上皮细胞和管型数量多而杂质少的沉渣。(2)用洗液对这些沉渣分别清洗3次，加50ml洗液和2.5%戌二醛5 ml混合，再放在混匀器上混合30分钟，置4℃冰箱过夜。第二天，取出后再用混匀器混合30分钟，离心弃去上液。(3)将醛化的各种细胞和管型按一定比例加入试验尿中，配成高低二种不同浓度的质控物，然后分装，每瓶10ml(分装前用混匀器混合5分钟)，放置冰箱备用。操作过程中避免细菌污染。(4)定值：随机抽取高、低值尿沉渣质控物各30支，混匀倒入.Biosed尿沉渣离心管内，离心1500r／rain5分钟，弃去上液留0.25ml沉渣混匀后滴入F—R板静止5分钟，镜检计数RBC、WBC、上皮细胞和管型。计算出每微升的数量，求出x-plusmn;2s作为质控物的参考范围。 二、结果 1、日间稳定性观察：取高、低二份不同值的质控物，每天用F-R板计数两次，共观察80天，求其 、s、vy%(表1)。 2.长期保存稳定性观察；将质控物制备时的定值分别与1个月、3个月、5个月后镜检计数，比较观察其保存期内数值变化。经统计学分析，观察期内计数的结果与制备时定值差异无显著意义(Pgt;0.05)(表2)。 3.尿沉渣质控物形态观察：放置5个月后的质控物，经镜检观察四种细胞形态规整，体积没有变化。白细胞、上皮细胞内的核清晰可见，管型内附着的颗粒和细胞也很明晰。 表1 尿沉渣质控物日间稳定性观察 三、讨论 采用病人尿中有形成分制备尿沉渣质控物材料来源方便、制备方法简便、易于操作。制备后的质控物放置5个月各种细胞形态基本保持了原细胞形状，清晰可辨。稳定性试验由表1、2反映出，日间变异较小，稳定性好。放置5个月后各种细胞和管型计数值与制备时定值差异无显著意义(Pgt;0.05)。 以往尿沉渣检查多采用玻片镜检法，由于该法操作不规范，如：尿沉渣留取的量多少不一、滴在玻片的沉渣厚薄不一、细胞分布不匀、每个人观察视野不一致等原因，造成检查结果出入较大。用这种方法进行质控必然出现很大误差。选用F-R计数板和Biosed尿沉渣定量离心管可弥补上述不足。F-R计数板具有操作简便、分布均匀、有固定的体积可以计算出每ul各种细胞的数量，重复性好。Biosed尿沉渣离心管底部有一凹陷正好留取0.25 ml沉渣，所以可按每ul尿沉渣所含的各种细胞数量报告。 在制备尿沉渣质控物时，采用血细胞分析仪稀释液做洗液能更好地维护各种细胞形态的完整和保持细胞体积原状。收集病人尿液时，应留取新鲜晨尿，最好把病人尿液全部收集起来，这样能增加沉渣的数量。收集后应立即处理，以免各种成分自行破坏或生长细菌。在制备过程中沉渣洗涤要充分，离心速度不能太快以防细胞变形或聚集。加戌二醛应边混合边加，滴加速度要慢使细胞醛化均匀，有利于质控物的长期保存。