碱性成纤维细胞生长因子对小鼠.PDFVIP

／_、 j {汀 中国病理生理杂志 ChJnesoJcunkalofPat|啦 -ol( ． 12 中国科技论文在线 [文章编号] 11300—4718(2000)02—0131—04 碱性成纤维细胞生长因子对小鼠 j 脾脏细胞凋亡的抑制作用 ％ l V 苎— ，许艳丽，李校坤，林 剑，型盟筮． (1．暨南大学生物工程研究所，广东 广4,rl5113632；2 白求思压科大学放射生物教研室，吉林 长春 130o21) [摘 要] 目的和方法：X射线照射结合元血清培养诱导小鼠脾细胞凋亡，采用流式细胞术定量分析碱性 成纤维细胞生长因子(bFGF)对脾细胞凋亡的抑制作用，井采用淋巴细胞转化试验[H]一TdR掺^法检测bFC．F 对脾细胞的增殖效应。结果：小鼠经过不同剂量X射线照射，脾细胞再经过不同时程元血清培养，都出现了典型 的亚二倍体Ap峰，I,,,g／mE和2SS／L的bFGF均可降低Ap峰中的细胞数(细胞凋亡率)．并能显著增强脾细胞 的增殖反应能力。结论：bFGF可抑制外周免疫器官脾细胞的凋亡，并促进其增殖 增强机体免疫力。 [主题词]成纤维细胞生长因子，碱性；脾；细胞： 且 [中国分类号] R39212 [文献标识码]A j}=移娓。 5『蠛亍_ J}尸 碱性成纤维细胞生长 因子 (basicfibroblast 机进行单次全身照射，电压200kV，电流 10mA，滤 growthfactor，bFcF)作为一种多肽类生长因子，具 板铜 O．5film，铝 1．0illgn，照射源距靶 中心垂直距 有广泛的生理功能。对来源于中胚层和神经外胚 离50㈨ ，剂量率 0．287Gy／min，总剂量分别为O 层的细胞具有促有丝分裂作用；在胚胎发育和组织 Gy，O．5 ，1．0Gyc 分化中，是形态形成、促细胞分裂和诱导细胞分化 ：、脾细胞悬液制备和培养 不可缺少的因子。此外，bFGF具有改变细胞趋化 小鼠照射 14h后断头处死，无菌条件下取脾 性，诱导或抑制细胞特殊蛋 白合成或分泌，调节 内 脏置于RPMI1640培养液中研磨制成单细胞悬液， 分泌和神经活动等功能 【 bFGF在免疫系统方 调整细胞浓度 5×106个细胞／mL于 24孔培养板 面，有研究表明bFGF能明显促进巨噬细胞的吞噬 中，分 3组：对照组(不加bFGF)，给药组(1te／mL 作用，并发现巨噬细胞可分泌多种细胞因子，包括 和2te／mLbW．F)，于37~C5％c 培养箱中无血 bFGF，但其生物学意望还不清楚。近几年来．体外 清培养0h，18h，24h，36h。 实验结果表 明体外许多因素可诱发细胞凋亡，如去 三 、流式细胞术 J 除血清或某些细胞因子(如bFGF)等．培养的细胞 收集培养的细胞于测量管中，取沉淀细胞快速 将发生罚亡L4,5。因此认为bFGF与细胞凋亡关系 注入 75％玲乙醇中固定，PBS洗 2次，离心，弃上 密切 本文试 图研究 bFGF对 x射线照射结台无 清，加 0．1mg／mLRNase100tsL，37℃水浴 30min， 血清培养诱导的小鼠脾细胞凋亡的作用，一方面了 PBS洗2次，加 PI染液0．5mL，4~C避光30 n。采 解它对免疫系统细胞凋亡的影响，另一方面对阐明 用美国B—D公司生产的 FACScan流式细胞仪，激 bFcF与捅亡异常疾病的关系及 bFGF对凋亡的调 发光源为 15mw，氩离子激光 ，波长488nrI1．细胞凋 控机制具有重要