电针对帕金森大鼠行为学和中脑黑质TH的影响.docVIP

精品论文 参考文献 电针对帕金森大鼠行为学和中脑黑质TH的影响 DOI：10.7504/nk2016010203 中图分类号：R587.1 文献标识码：A 　　摘要：目的：观察电针百会、太冲、三阴交对鱼藤酮致帕金森（PD）大鼠的行为学变化和中脑黑质中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)的影响，研究针刺治疗PD的作用机制。方法：78只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、西药组和电针组，采用颈、背部皮下注射鱼藤酮溶液0.8mg/kgmiddot;d制备PD大鼠模型，造模成功后，西药组给予美多巴混悬液灌胃，1.67mg/kgmiddot;d，电针组选百会、三阴交、太冲穴，用phi;0.30mmtimes;13mm毫针刺入，接韩氏电针仪，采用疏密波，频率疏波2Hz、密波80Hz，强度2.0mA，每次10mg/kgmiddot;d，电针正极接一侧三阴交，负极接同侧太冲，双侧相同；西药和电针组均7d/疗程，共治疗2个疗程，疗程间休息1d；除西药组外，其余各组均灌服等体积的生理盐水；除电针组外，其余各组也均采用同一体位固定10min。各组大鼠行为学测试后脱臼处死，取脑，行中脑黑质TH免疫组化(S-P法)染色检查。结果：悬挂实验：模型组评分值低于正常组，P＜0.05，电针组评分值均高于模型组，P＜0.05，西药组评分值与模型组相比，P＞0.05，电针组评分值与西药组相比，P＞0.05；网格实验：模型组大鼠移动潜伏期大于正常组P＜0.05，电针组低于模型组，P＜0.05，西药组与模型组相比，P＞0.05，电针组与西药组相比，P＞0.05。结论：电针百会、太冲、三阴交具有改善PD大鼠行为学，可使模型大鼠中脑黑质区TH免疫反应阳性神经元数目明显增多，为临床应用电针治疗PD提供了理论支持。 　　关键词：电针；帕金森；悬挂实验；网格实验；开阔实验；酪氨酸羟化酶；大鼠 　　PD是常见的中老年神经系统变性疾病，临床以静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步态异常为主要特征[1]。主要病理改变为中脑黑质DA能神经元逐渐变性死亡，纹状体 DA含量下降[2]。本病在我国65岁以上人群患病率为2.05%。随着人类平均寿命的延长和社会老龄化的到来，PD发病率呈明显上升趋势，成为影响人类身体健康和生活质量的重要疾病。 　　1材料和方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 实验动物 选用清洁级Wistar大鼠，雄性，体重200plusmn;20g，由河北医科大学动物实验中心提供。合格证号：201103042。动物喂养使用河北医科大学动物实验中心提供的大鼠基础饲料。在河北医科大学中医学院实验中心提供的清洁级动物实验房饲养，室温20～24 ℃，自然采光，通风良好。 　　1.1.2 实验针具及药物 华佗牌无菌不锈钢毫针，phi;0.30mmtimes;13mm；韩氏(HANS)电针仪，型号LH202H，北京华卫产业开发公司；多巴斯肼片(美多芭)，上海罗氏制药有限公司，批号实验时采用生理盐水配制成所需浓度的混悬液。 　　1.1.3 实验试剂和仪器 鱼藤酮(RoteNone)，石家庄植物农药研究所，批号：SZY，实验时采用二甲基亚砜配制成所需浓度的溶液；二甲基亚砜(DMSO)，天津市凯通化学试剂有限公司，批号：Q/HG3144-99；免疫组化染色试剂盒，北京中杉金桥生物技术有限公司；HM-200型电子分析天平，日本AND； 600型电热恒温水箱，天津；DW-40L262立式低温冷藏箱，青岛海尔医用低温科技有限公司；2035型LEICA切片机，德国；Citadel-2000包埋机英国姗顿公司； HMIAS-2000显微图像分析系统，武汉同济医科大学。 　　1.2 方法 　　1.2.1 78只Wistar大鼠均自然光照，自由饮水进食，正常饲养1周后，根据参考文献[3]造模，随机选取58只作为模型组大鼠，采用颈、背部皮下注射鱼藤酮溶液0.8mg/ kgmiddot;d，(溶剂为二甲基亚砜，浓度为2mg/ml) 28d制备PD大鼠模型；其余20只作为正常组注射等体积的溶剂。造模结束后，通过网格实验、悬挂实验和开阔实验对比模型组和正常组大鼠的行为学变化，模型组和正常组各随机选取10只剖杀，观察组织形态和神经生化变化，以判定造模成功与否。造模成功后将模型组大鼠随机分为模型组、西药组和电针组。 　　1.2.2 治疗方法 造模成功后，西药组大鼠每日给予美多巴混悬液灌胃1.67mg/kgmiddot;d(生理盐水配制的浓度为25mg/ml的美多巴混悬液)；电针组大鼠每日按顺序给予治疗，将大鼠固定在自制束鼠器上，参照全国针灸学会实验针灸研究会制定的《实验动物针灸穴位图谱》，选百