病毒性心肌炎患者血浆microRNA-21表达变化及其临床意义.docVIP

精品论文 参考文献 病毒性心肌炎患者血浆microRNA-21表达变化及其临床意义 病毒性心肌炎患者血浆microRNA-21表达变化及其临床意义 梁磊 李秀红 王毅 闫丽 酉鹏华 （陕西省人民医院 陕西西安 710068） [摘要]:目的 检测病毒性心肌炎患者（VMC）血浆中microRNA-21（miR-21）的表达水平变化，并初步探讨其临床意义。方法 选择45例VMC患者及45例健康体检者， RT-PCR检测血浆中miR-21的表达水平，分析其与肌钙蛋白T（cTnT）水平的相关性。结果 VMC患者血浆中miR-21表达水平明显高于正常对照组，差异具有统计学意义（P lt; 0.01）；miR-21表达水平与cTnT 水平呈明显正相关（P lt; 0.05）。结论 VMC患者血浆中miR-21水平增高，miR-21可能参与了VMC的病理过程。 [关键词]：病毒性心肌炎；微小RNA；肌钙蛋白T 微小RNA（microRNA，miRNA，miR）在炎症、肿瘤、自身免疫性疾病等多种病理过程中，均发挥重要作用[1]。近年有学者研究发现，miR-21在病毒性心肌炎（viral myocarditis，VMC）动物模型及患者心肌组织中表达异常，提示miR-21可能参与了VMC发病过程[2]。本研究检测了VMC患者血浆中miR-21的表达变化，并初步探讨其临床意义。 1 材料与方法 1.1研究对象 选取2014年1月-2015年2月在我院心内科住院确诊的VMC患者45例。排除标准：恶性肿瘤、风湿性心肌炎、中毒性心肌炎、缺血性心脏病、肺纤维化、感染性疾病、自身免疫性疾病、妊娠或哺乳期妇女。45例同期健康体检者作为对照组。两组研究对象在年龄、性别构成的比较，差异无统计学意义(Pgt;0.05)。 1.2 方法 1.2.1 样本采集 所有实验对象空腹12 h后采静脉血，室温下离心后收集上清至无RNA酶的EP管中，-80℃保存。 1.2.2. RT-PCR检测血浆中miR-21水平 采用miRNA分离试剂盒取血浆总RNA，根据文献[1]的步骤合成miR-21及内参照及PCR引物，根据miScript Reverse Transcription 试剂盒说明书进行逆转录反应。基因表达水平采用2-△△Ct进行分析，Delta;Delta;Ct =实验组Delta;Ct (目的基因Ct-内参基因Ct)-对照组Delta;Ct(目的基因Ct-内参基因Ct) 。 1.2.3 血清中肌钙蛋白T（cTnT）水平的检测 所有实验对象采集血标本，常规检测cTnT水平。 1.3 .统计学方法 所有数据采用SPSS 16.0软件进行统计学处理，计量资料采用均数plusmn;标准差（plusmn;s）表示，两样本均数比较采用 t 检验，相关性分析采用Pearson 相关法。P lt;0.05 为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 miR-21水平的比较 RT-PCR检测结果发现，VMC患者血浆中miR-21表达水平为（1.87plusmn;0.63），明显高于正常对照组的（0.82plusmn;0.31），差异有统计学意义（t=10.031，P lt; 0.01）。 2.2 miR-21水平与cTnT 水平的关系 统计分析结果显示，VMC患者血浆中miR-21表达水平与cTnT 水平呈明显正相关（r=0.647，P lt; 0.05）。 3讨论 自从miRNA- lin-4首次于1993年在线虫中被发现，目前在多种生物体内鉴别出大量的miRNAs，miRNA在生理病理过程均发挥重要的调控作用。人miR-21基因定位于17q23.2，与蛋白编码基因VMP1、编码RNA U6基因及人类乳头状瘤病毒16的整合位点的位置重叠。研究表明，miR-21在多种实体瘤及血液系统肿瘤中呈高表达，还参与了肺纤维化、系统性红斑狼疮等病理过程[1,2]。 miR-21在心肌细胞、成纤维细胞、内皮细胞及血管平滑肌细胞中均有表达。但有关miR-21与VMC的研究刚刚起步。Liu等[2]利用miRNA芯片技术检测发现，CVB3诱导的小鼠心肌炎模型心脏组织中miR-21表达上调，下调miR-21的表达可以减轻心肌炎。但国内学者在人的心肌炎右心室室间隔组织中检测miR-21的表达水平没有变化[3]，在CVB3诱导的小鼠心肌炎模型心肌组织中miR-21的表达水平甚至下调[3]。这可能与实验所选择的动物模型、检测方法、检测时间及采样部位不同等因素有关。由于miRNA长度较短且具有较强的抵抗RNA酶降解的作用