病理学技术在舍格伦综合征诊断中的应用.docVIP

精品论文 参考文献 病理学技术在舍格伦综合征诊断中的应用 陈茂文 高超 邹茜 刘龙珠 李耀 　　（长沙医学院 湖南长沙 410100） 　　【摘要】自舍格伦综合征这个概念提出以来，对其诊断方法就一直成为口腔医生的研究热点。舍格伦综合征是一类自身免疫疾病，病因复杂多样，诊断难度大。随着病理学技术的不断进步，对舍格伦综合征的诊断中具有重要的意义。本文旨在系统回顾各种病理学技术在舍格伦综合征诊断中的应用。主要包括免疫荧光技术，酶联免疫吸附检测，SP染色法和ISH技术，拉曼光谱特征研究，免疫印迹法免疫细胞分离钝化和PCR扩增技术等，为提高舍格伦综合征诊断效率提供依据。 　　【关键词】 病理学技术；舍格伦综合征；SS诊断标准 　　【中图分类号】R44 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）02-0057-02 　　舍格伦综合征(Sjogren ssyndrome，SS)是一种破坏自身外分泌腺如泪腺、唇腺的一种自身免疫性疾病，特征表现为口腔黏膜及结膜干燥，并伴有各种自身免疫性疾病。病变局限于外分泌腺者称为原发性舍格伦综合征，而伴发风湿性关节炎，系统性红斑狼疮等其他自身免疫病者称为继发性舍格伦综合征。[1]病理表现为淋巴细胞大量侵润腺体及组织细胞增生，其中侵润细胞主要为T细胞。[1-2]SS的发病机制尚未明确。早在二十世纪三十年代，瑞典的眼科医生Sjogren首先报道了干燥性角膜炎伴口干症的病例，部分患者伴有其他免疫性疾病。随着人们对SS进一步的认识和病理学技术的发展，SS被认为是一种自身免疫性疾病，正常人群中的发病率为0.6%，男女比例为1:9[3-4]。 　　1.SS的诊断标准 　　SS的诊断多采用综合性治疗的方案，目前国际上较多的是2002年国际诊断分类标准。诊断标准①口干症状②眼干症状③口干体征，放糖实验30min内未化；④眼干体征，施墨实验le;5mm/5min；⑤组织学检查，唇腺淋巴细胞侵润灶＞1；⑥血清学检查，类风湿因子，抗SS-A，抗SS-B至少一项为阳性。SS在无任何潜在疾病的情况下，有下述任何两条即可诊断：①符合上述分类标准4条或4条以上，但必须含有第4条和第6条。②2,4,5,6中任何3项阳性，继发性SS患者有潜在的疾病，而符合上述分类标准1,2中的任何一条，同时符合3,4,5中的任何两项即可诊断[5]。 　　2.病理学技术的应用 　　随着医学技术的发展和进步，使病理技术进入了一个崭新的时代，新的技术，产品的投入应用推动着病理技术的发展，逐渐形成了传统病理技术的石蜡切片，HE染色与免疫组化染色，分子生物的密切结合，形成了新的现代病理学技术。目前已近进入数字病理时代[6]。病理学技术在对口腔疾病的诊断中越来越占有重要的地位，特别是在口腔黏膜病，头颈部肿瘤，以及唾液腺疾病的诊断中被广泛应用。本综述主要回顾现代病理学技术在舍格伦综合征诊断中的应用。 　　3.病理学技术在舍格伦综合征诊断中的应用 　　3.1 免疫荧光技术在SS诊断中的应用 　　免疫荧光技术是免疫组化技术的一种手段，运用抗体和抗原结合的原理，再辅以标记物能在组织中或细胞内显示抗体或抗原成分及其分布的方法[7]。包括直接免疫荧光技术和间接免疫荧光技术。由于免疫荧光技术具有组织特异性和抗原组织的精确性，故已成为医学领域中广泛的研究及检测方法之一。 　　随着该技术的发展，在口腔疾病诊断中已得到广泛应用。在对SS诊断中，由于在舍格伦综合征中患者腺体内的腺管上皮细胞变性，腺泡被大量淋巴细胞取代，机体产生自身循环抗体和抗导管抗体，可通过间接免疫荧光技术和直接免疫荧光技术检测出来[8]。 　　3.2 酶联免疫吸附检测 　　酶免疫技术(ELISA)基本的原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价键结合后，酶标记抗体可以与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合[9]。加入底物浓度后，酶作用下使其所含的氢供体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现呈色反应[10]。 　　由于ELISA敏感性高，操作简便，配套仪器的使用发展视操作程序规范化和自动化，并进一步提高的稳定性，被运用于舍格伦综合征的病理诊断中。骨桥蛋白（OPN）是今年发现的一种炎症细胞因子[11]。广泛存在与炎症部位的细胞外基质中，通过调节T,B细胞的分化和功能，在舍格伦综合征发病，发展中起着关键作用。一些研究表明TNF-alpha;作为CD4＋T分泌的最重要因子，在SS病患的唾液腺和泪腺病损中起着调节作用[12-14]。TGF-beta;是多功能细胞因子，抑制T.B细胞分化和增殖，是一种负性免疫调节因子[15]。在对SS患者血清ELISA检测中发现骨桥蛋白，TNF-alpha;，TGF-beta;