发酵液中23丁二醇的双水相分离研究.pdfVIP

发酵液中2,3-丁二醇的双水相分离 江波 孙丽慧 李志刚 张江红 修志龙∗ (大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系，辽宁大连116024) 摘 要： 研究了从发酵液中双水相萃取2,3-丁二醇的工艺条件，以目标产物的分配系数和回收率为指标， 分别考察了不同双水相萃取体系以及相组成对 2,3-丁二醇分配的影响，确定了适合于 2,3-丁二醇发酵液萃 取的最佳相组成。结果表明适合2,3-丁二醇双水相萃取的体系为乙醇/磷酸氢二钾体系，对于 2,3-丁二醇发 酵液，当操作工艺为：24%(w/w) 乙醇/ 25%(w/w) 磷酸氢二钾时，2,3-丁二醇的分配系数和回收率分别可达 28.33 和98.13% ；同时，上相中菌体和可溶性蛋白去除率分别可达99.63%和85.9%，上相可溶性蛋白降为 0..700g/L ；86.60%的发酵残糖分配于下相，产物和底物得到了有效的分离。该工艺操作简单，能够有效地 分离发酵液中的2,3-丁二醇。 关键词：2,3-丁二醇；双水相萃取；乙醇/磷酸氢二钾 中图分类号：Q815 ∗作者简介：江波(1985-)，男，汉族，河北邢台宁晋人，硕士研究生，生物化工专业； 修志龙，通讯联系人，E-mail: zhlxiu@dlut.edu.cn ，Tel: 0411。 1 前言 2,3-丁二醇（2,3-butanediol, 2,3-BD）是一种无色、无嗅的液体，具有吸湿性；沸点 为178～182℃，与水混溶，溶于乙醇、乙醚。2,3-丁二醇是一种重要的化工原料,可以用来 合成其它化学品，如通过Diels-Alder 反应聚合形成苯乙烯，酯化生成聚氨酯泡沫材料的前 体，该种材料在药品、化妆品、洗涤剂中具有广泛的用途。2,3-BD 很容易脱水产生甲乙酮， 甲乙酮可进一步脱水形成 1,3-丁二烯。2,3-丁二醇还可用来制备聚合物、油墨、香水、熏 [1,2,3] 蒸剂、增湿剂、软化剂、增塑剂、炸药以及药物的手性载体等等 。 2,3-丁二醇主要采用发酵法进行生产，以各种糖类物质为底物，接种微生物经发酵而得。 在上个世纪，2,3-丁二醇的发酵技术取得了很大的进步[4，5] ，但由于2,3-丁二醇的沸点太高， [2,6] 并具有高亲水性，而且发酵液成分复杂，因而使得2,3-丁二醇的提取工艺变得相当复杂 。 近年来，对于 2,3-丁二醇分离方面的文献报道较少，文献中报道的主要分离方法包括：逆 流气提法、有机溶剂萃取法、反相渗透法和全蒸发技术。1945 年和1948 年工业级逆流气提 法提取装置分别在伊利诺斯和加拿大成功建立[7]，但是这种分离方法耗能较大，阻止了其在 工业化过程中的广泛应用；对于 2,3-丁二醇的有机溶剂萃取，也开展了一系列的研究，但 是一直没有发现合适的萃取剂[8]；之后，发展了用KCl 和无水 K CO 盐析的方法进行分离， 2 3 由于发酵液中目标产物浓度较低，分离效果并不好[2]；过蒸发、膜蒸馏和真空膜蒸馏等方法 也都普遍存在是能耗大、成本高等缺点。2,3-丁二醇的有效分离成为制约这个产业发展的主 要问题之一。 普通亲水性有机溶剂在一定量无机盐存在下可形成双水相体系，这种新型双水相萃 取技术相比其他分离方法具有操作简单、条件温和、选择性高、收率高、能耗较小、能实现 快速分离、易于进行连续化操作等一系列优点而受到重视[9],但是此方法直接用于发酵液中 2,3-丁二醇的分离还未见报道。 本工作以2,3-丁二醇的分配系数和回收率为评价指标，对多种双水相体系进行了考察， 确定了萃取2,3-丁二醇的最佳操作工艺，为此方法用于2,3-丁二醇的工业分离提供了一定 的理论基础。 2 实验 2.1 实验材料 实验试剂：实验过程中所用化学试剂均为分析纯以上级别； 实验材料：2,3-丁二醇购自Sigma 公司；发酵液为以Klebsiella pneumoniae CICC 10011 为菌种，葡萄糖为底物批式-流加发酵所得，2,3-丁二醇浓度为 65.23g/L ，乙偶姻