生物制药专业实验课件（吉林大学）实验具体操作 一.pptVIP

* * 实验内容 先洗刷试管 粗酶制备 Pr曲线 洗刷血糖管备用 实验操作 洗刷试管放于烘箱（本日测蛋白浓度标准曲线） 蔗糖酶粗品的制备 ① 称取20g高活性干酵母粉(2组3袋，记录生产厂家和批号：条形码、日期、GB/T…)倒入250ml烧杯中、少量多次地加入50ml蒸馏水，搅拌均匀，成糊状后加入2g乙酸钠、30ml乙酸乙酯，搅匀，然后采用自溶或超声方法进行处理： 自溶：于35℃恒温水浴中搅拌40分钟； 超声波破碎（6组）：使用超声波破碎仪在50%的功率（约450W左右），超声20min（40min）, 超5s停5s，Φ6探头。（冰浴） ②保温过夜：补加蒸馏水30ml，搅匀，用硫酸纸封严（提醒补加30ml），于保温箱内35℃恒温过夜。 Folin-酚法测定蛋白质含量工作曲线的制作 ①取7支试管（干燥）按下表中顺序加入各种试剂并进行反应和测定 　　　 试管号 1 　2 3 4 5 6 7 蛋白质标准溶液(ml) 　0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 去离子水 　1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0 Folin甲试剂 　　 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 室温下振荡10min（先涡旋一下，后手摇即可） Folin乙试剂 　4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 立即摇匀，于55℃水浴中保温5min，用冷水冷却1min,650nm处测吸光度A650 ②以1号管为参比调零，记录光密度值A650，以加入标准液BSA的μg数为横坐 标， A650值为纵坐标，画出工作曲线。 标准液BSA的μg数=250 μg/ml *蛋白质标准溶液的体积(ml) BSA标准液 250 μg/ml 实验报告 实验目的（五天内所有试验的实验目的，可打印 ） 实验原理（五天内所有重要试验技术的实验原理，可打印 ） 自溶法或超声破碎原理 Folin-酚法测定蛋白质含量的原理 乙醇分级原理 透析原理 ……………….. 3. 实验步骤及现象（标明原始数据和现象） 实验前主要写：实验过程、实验操作（要体现如何作，重复性） 实验中主要记：实验现象（例：XX分层）、原始数据（例：加入Xml 溶液）、实验仪器（例：型号）、实验药品 结果及讨论（标准曲线、数据处理、现象分析、结果讨论,手写） 其中，2条标准曲线、正交试验数据、米氏常数、电泳图（可打印） 示例： 实验前完成 实验过程中随时记录 * *